इसका उपयोग सतही मायकोसेस के निदान में नहीं किया जाता है। माइकोसिस सूक्ष्म परीक्षा का सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान

माइक्रोस्कोपी -यह माइकोसेस के प्रयोगशाला निदान में मुख्य विधियों में से एक है। यह अध्ययन उस दिन से करना आवश्यक है जब पोषक माध्यम पर पहली कॉलोनियां दिखाई देती हैं। सूक्ष्म परीक्षण से पहले, यह जानना आवश्यक है कि कवक खमीर है या मोल्ड - उपनिवेशों की उपस्थिति से, अंकुर परीक्षण के परिणाम।

जब सांचों की माइक्रोस्कोपी, माइसेलियम की संरचना को ध्यान में रखा जाता है (अर्थात हाइप की संरचनात्मक विशेषताएं, उनका रंग, सेप्टेशन; कोनिडिया और बीजाणुओं की संरचनात्मक विशेषताएं, आकार, आकार, कोनिडिया के रंग सहित; उनकी कोशिका भित्ति की संरचना, विभाजन, आदि)

माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार मूल निवासीऔर पेंटदवाएं। खाना पकाने के लिए पेंटतैयारी, सामग्री को विभिन्न तरीकों से संसाधित किया जाता है:

1. रंगपीए-तरीका।पीएएस विधि के उपयोग से सूक्ष्मजीवों की दीवारों में तटस्थ पॉलीसेकेराइड का पता लगाना संभव हो जाता है। न्यूट्रल पॉलीसेकेराइड एक ग्लूकेन-मन्नान कॉम्प्लेक्स है जो अधिकांश यूमीसेट्स की कोशिका भित्ति में स्थित होता है, जिसके कारण धुंधलापन होता है।

पीए-प्रतिक्रियाएं- फंगल संक्रमण के ऊतक रूपों के सूक्ष्म निदान के तरीकों में से एक। सूक्ष्म निदान के लिए व्यावहारिक प्रयोगशालाओं में, इस पद्धति के विभिन्न संशोधनों का उपयोग किया जाता है: क्रोमिक एसिड ऑक्सीकरण - बाउर प्रतिक्रिया; ग्रिडली दाग।

2. संबंधित सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए ग्राम दाग (ग्राम-वीगर्ट संशोधन)।

3. एसिड-फास्ट जीवों का पता लगाने के लिए ज़ीहल-नील्सन दाग। यदि अध्ययनाधीन सामग्री तरल, फिर तरल पदार्थ को साफ करने में माइक्रोस्कोपी के लिए इससे एक बिना दाग वाला धब्बा तैयार किया जाता है: 1: 1 के अनुपात में अल्कोहल और ग्लिसरॉल का मिश्रण।

अगला कदम माइकोलॉजिकल रिसर्च है।- कवक का अलगाव और पहचान। अध्ययन के तहत सामग्री के आधार पर इस चरण की विशेषताओं पर विचार करें।

माइकोलॉजिकल रिसर्च

सांस्कृतिक अनुसंधान।सांस्कृतिक अनुसंधान परीक्षण सामग्री से रोगज़नक़ के अलगाव पर आधारित है। विभिन्न प्रकार के कवक (2-4 दिनों से 4 सप्ताह तक) के लिए खेती की शर्तें अलग-अलग होती हैं, यदि डिमॉर्फिक कवक पर संदेह होता है, तो संस्कृति को 8 सप्ताह तक अलग किया जाता है। माइकोलॉजिकल प्रयोगशाला में खेती के लिए मुख्य माध्यम सबौराड माध्यम है: सबौराड डेक्सट्रोज अगर (घना माध्यम), सबौराड शोरबा (तरल माध्यम)। जीवाणु वनस्पतियों के विकास को दबाने के लिए, सबौराउड के माध्यम में एंटीबायोटिक्स (क्लोरैम्फेनिकॉल, जेंटामाइसिन, कम अक्सर स्ट्रेप्टोमाइसिन, पेनिसिलिन) मिलाया जाता है। सैप्रोफाइटिक कवक के विकास को दबाने के लिए, साइक्लोहेमेसाइड और क्लोरैम्फेनिकॉल को माध्यम में मिलाया जाता है। साइक्लोहेमेसाइड के साथ तैयार मीडिया हैं ( माइकोबायोटिक माइकोसेल).

अधिकांश रोगजनक कवक के लिए इष्टतम खेती मोड 30 0 सी, 20-25 0 सी, कम अक्सर 37 0 सी है - यदि डिमॉर्फिक कवक का संदेह है। अधिकांश मशरूम के लिए ऊष्मायन की अवधि 6 सप्ताह तक है; यदि इस समय के बाद कोई वृद्धि नहीं देखी जाती है, तो नकारात्मक उत्तर दें। 6 सप्ताह के भीतर विकास की अनुपस्थिति में संदिग्ध डिमॉर्फिक माइकोसिस के मामले में, संस्कृति को 8 सप्ताह तक रखा जाता है और उसके बाद ही नकारात्मक परिणाम मिलता है।

एक सांस्कृतिक अध्ययन में नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्णहैं:

एक सामान्य रूप से बाँझ सामग्री की जांच करते समय एक मोल्ड या खमीर कवक का अलगाव;

एक द्विरूपी कवक का अलगाव।

माइकोलॉजिकल रिसर्च एल्गोरिथम

1. रोगज़नक़ (माइक्रोस्कोपी) के कवक एटियलजि का निर्धारण।

2. खमीर कवक या मोल्ड का निर्धारण करें:

नैदानिक ​​सामग्री की माइक्रोस्कोपी (मायसेलियम की उपस्थिति);

पोषक माध्यम पर उपनिवेशों की प्रकृति, विकास दर (खमीर कवक 48 घंटे बढ़ते हैं, मोल्ड कवक धीरे-धीरे बढ़ते हैं)।

3. कवक की प्रजातियों के स्तर (अंतःविशिष्ट) की अंतिम पहचान जैव रासायनिक परीक्षणों और प्रतिरक्षाविज्ञानी विधियों का उपयोग करके की जाती है। जैवरासायनिक गुणों के अध्ययन में पृथक कल्चर को आत्मसात करने की क्षमता (ऑक्सानोग्राम) और किण्वन (जाइगोग्राम) का अध्ययन किया जाता है। स्वचालित पहचान प्रणाली (कवक की पहचान के लिए परीक्षण प्रणाली) का उपयोग करना संभव है।

अवसरवादी कवक के अलगाव के एटियलॉजिकल महत्व के लिए मानदंड

1. यदि देशी तैयारी (सैप्रोफाइटिक वनस्पति) में केवल ब्लास्टोस्पोर दिखाई दे रहे हैं, तो इसे वाहक माना जाता है।

3. यदि ब्लास्टोस्पोर एकल हैं और स्यूडोमाइसीलियम प्रबल होता है, तो यह गहरे अंग क्षति का संकेत है।

4. ब्लास्टोस्पोर का सक्रिय रूप से नवोदित होना एक तीव्र प्रक्रिया का प्रमाण है।

5. परिणामों का मात्रात्मक मूल्यांकन - तनुकरण से कवक का अलगाव

10 - मल, मूत्र;

10 - थूक।

6. एक ही प्रकार के फंगस की बार-बार बुवाई करना

7. पृथक तनाव के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति।

म्यूकोसल डिस्चार्ज की माइकोलॉजिकल जांच

1. सामग्री की तैयारी।श्लेष्मा झिल्ली से सामग्री लेने के बाद, स्वाब को सबौराड के तरल माध्यम या वोर्ट-एगर, या बीसीएच के 2 मिलीलीटर में रखा जाता है, जिसे बाँझ परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। कॉर्क को भिगोने की कोशिश नहीं करते हुए, उन्हें 5 मिनट के लिए अच्छी तरह से हिलाया जाता है। परिणामी निलंबन आदि से 1:10 और 1:100 के कई तनुकरण तैयार किए जाते हैं।

प्रत्येक कमजोर पड़ने से, 0.1 मिली प्रति 2 कप पौधा अगर, सबौराद अगर या एमपीए का टीका लगाएं। ठोस मीडिया पर टीकाकरण और संवर्धन के लिए एक तरल माध्यम के साथ एक टेस्ट ट्यूब +37 0 पर 48 घंटों के लिए ऊष्मायन किया जाता है:

बीते हुए समय के बाद फसलों को देखा जाता है और कॉलोनियों की संख्या की गणना की जाती है और यीस्ट कॉलोनियों की संख्या लगभग निर्धारित की जाती है। उनकी संख्या को 20 से गुणा किया जाता है और जिस तनुकरण से बीजारोपण किया जाता है;

यदि तनुकरण से बने इनोक्यूलेशन के साथ प्लेटों पर कोई वृद्धि नहीं होती है, तो संवर्धन माध्यम से वार्ट अगर के साथ एक प्लेट में पुन: टीकाकरण किया जाता है।

रक्त की माइकोलॉजिकल जांच

1. सामग्री की तैयारी।रक्त के नमूने के बाद, इसे 1:10 पतला किया जाता है ताकि रक्त के जीवाणुनाशक गुण कवक के विकास को बाधित न करें।

2. सांस्कृतिक अध्ययन।

5-10 मिलीलीटर रक्त को 2% ग्लूकोज के साथ Sabouraud के तरल माध्यम के 50-100 मिलीलीटर में टीका लगाया जाता है। 37 0 सी के तापमान पर उन्हें एक सप्ताह के लिए ऊष्मायन किया जाता है;

5 दिनों के बाद नियंत्रण बीजाई करें। ऐसा करने के लिए, तलछट को एक बाँझ पिपेट के साथ लिया जाता है;

सीडेड कपों को थर्मोस्टैट में 37 0 सी पर 2-5 दिनों के लिए रखा जाता है;

यदि वृद्धि का पता चलता है, तो कवक के बारे में प्रारंभिक उत्तर जारी किया जाता है, और अध्ययन के दौरान कवक की आगे की पहचान की जाती है।

बायोप्सी नमूनों की माइकोलॉजिकल जांच

1. सामग्री लेने के लिए छापों की विधि का उपयोग किया जाता है।

2. सांस्कृतिक अध्ययन:

घने सबौराड पोषक माध्यम की सतह पर अध्ययन के तहत ऊतक के एक टुकड़े के साथ एक छाप बनाई जाती है;

ऊतक का एक ही टुकड़ा तरल पोषक माध्यम (पौधे या सबौराड) के 50 मिलीलीटर में रखा जाता है;

फसलों को 5 दिनों के लिए 37 0 सी पर ऊष्मायन किया जाता है।

पहला स्वागत

प्रयोगशाला निदान

त्वचा मायकोसेस के निदान के लिए सबसे प्रभावी तरीके विभिन्न प्रयोगशाला परीक्षण हैं जो रोगज़नक़ की पहचान कर सकते हैं और एक चिकित्सा आहार के चयन में मदद कर सकते हैं। माइकोसिस के प्रेरक एजेंट की पहचान करने के लिए, निम्नलिखित प्रयोगशाला परीक्षण निर्धारित हैं:

• ऊतकीय विश्लेषण;
• बैक्टीरियोलॉजिकल संस्कृति;
• प्रतिरक्षाविज्ञानी अनुसंधान;
• पीसीआर निदान;
• सांस्कृतिक परीक्षा;
• सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान।

रक्त और त्वचा पर माइकोसिस का पता लगाने के लिए माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स सबसे आम और सरल तरीका है। एक सटीक निदान की पहचान करने के लिए, आपको पता होना चाहिए कि अध्ययन में आवश्यक सामग्री को ठीक से कैसे एकत्र किया जाए। प्रभावित बालों को चिमटी से इकट्ठा करना चाहिए। यदि त्वचा संक्रमित है, तो माइक्रोस्कोपी के लिए क्षतिग्रस्त क्षेत्र से त्वचा को हटा दिया जाना चाहिए। सभी ली गई सामग्री को 30% पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड घोल में रखा जाता है, और फिर एक कांच की स्लाइड पर रखा जाता है। माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स यह पहचानने में सक्षम है कि कवक कहाँ स्थित है (बालों, त्वचा के अंदर या बाहर) और इसका आकार।

माइकोसिस के गलत निदान को रोकने के लिए, सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के लिए सामग्री को सही ढंग से और सक्षम रूप से लेना आवश्यक है।

चिकित्सा में, सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान के ऐसे तरीके हैं:

• देशी या बिना दाग वाली तैयारी का उपयोग करके माइक्रोस्कोपी। ऐसा करने के लिए, सामग्री को पोटेशियम या सोडियम हाइड्रॉक्साइड के 10-30% समाधान के साथ स्पष्ट किया जाता है। फिर संसाधित सामग्री को एक प्रयोगशाला कांच पर रखा जाता है, जहां पहले थोड़ा सा ग्लिसरीन गिराया गया था। एक कांच की प्लेट के साथ शीर्ष कवर और विश्लेषण करें।
• सना हुआ तैयारियों की माइक्रोस्कोपी कई तरीकों से की जाती है जो बैक्टीरिया की पहचान करते हैं, विभिन्न बैक्टीरिया को अलग करते हैं, और विभिन्न कवक की पहचान करते हैं।

बैक्टीरियोलॉजिकल कल्चर

बैक्टीरियोलॉजिकल कल्चर सबसे अधिक में से एक है प्रभावी तरीकेनिदान के लिए।

पोषक माध्यम पर बैक्टीरियोलॉजिकल सीडिंग का संग्रह माइकोसिस के निदान का एक सटीक तरीका है। मानते हुए दिखावटऔर कवक की विकसित कॉलोनी की विशेषताएं, त्वचा विशेषज्ञ उस रोगज़नक़ के प्रकार को निर्धारित करता है जो माइकोसिस का कारण बनता है। सर्वेक्षण का एकमात्र नुकसान यह है कि एक कॉलोनी विकसित होने में काफी समय लगता है। औसतन, रोगज़नक़ के तनाव का पता लगाने में लगभग 3 सप्ताह लगते हैं। कुछ मामलों में, विधि अपेक्षित परिणाम नहीं लाती है।

पीसीआर डायग्नोस्टिक्स

पीसीआर डायग्नोस्टिक पद्धति में पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का उपयोग करके माइकोसिस के प्रेरक एजेंट की पहचान शामिल है। परीक्षा के दौरान, संकरण की संवेदनशीलता बढ़ जाती है, जिससे परीक्षण सामग्री में वायरल डीएनए की सामग्री बढ़ जाती है। यह परीक्षा पद्धति नई है और रोगी से कई परीक्षणों की आवश्यकता होती है। ऐसा माना जाता है कि इस प्रकार का निदान काफी महंगा है, लेकिन सटीक परिणाम देता है।

सांस्कृतिक परीक्षा

निदान के अंतिम चरण में सांस्कृतिक निदान उपायों की सिफारिश की जाती है। विधि में कवक की एक संस्कृति प्राप्त करना शामिल है, जिसे बाद में माइक्रोस्कोप का उपयोग करके जांच के लिए भेजा जाता है। परिणामी सामग्री को कृत्रिम रूप से बनाए गए पोषक माध्यम पर रखा जाता है और रोगज़नक़ के प्रकार, उपस्थिति, आकार की पहचान की जाती है। उसके बाद, एक विशेष उपचार दिखाया जाता है, जिसका उद्देश्य एक विशिष्ट प्रकार के माइकोसिस के प्रेरक एजेंट का मुकाबला करना है।

वैज्ञानिकों के अनुसार, दुनिया की 70% आबादी में एथलीट फुट के लक्षण हैं। इस बीमारी में इंटरडिजिटल फोल्ड और तलवों की त्वचा प्रभावित होती है। रोग का कारण एक कवक है जो मूल रूप से केवल दक्षिण पूर्व एशिया और अफ्रीका के सीमित क्षेत्रों में पाया जाता था। प्रथम विश्व युध्दजनसंख्या के बड़े पैमाने पर प्रवास और स्वच्छता की स्थिति के बिगड़ने के कारण, दुनिया भर में इस बीमारी का प्रसार हुआ।

एथलीट फुट का क्या कारण है

रोग का मुख्य प्रेरक एजेंट ट्राइकोफाइटन रूब्रम है। टी. मेंटाग्रोफाइट्स और एपिडर्मोफाइटन फ्लोकोसम नुकसान पहुंचा सकते हैं। बहुत कम बार, जीनस कैंडिडा और मोल्ड सूक्ष्मजीवों के कवक रोगजनक रोगाणु बन सकते हैं।

रोग के लिए सबसे महत्वपूर्ण जोखिम कारक:

• मधुमेह;
• इम्युनोडेफिशिएंसी स्टेट (एड्स);
• सपाट पैर;
• परिधीय धमनियों के एथेरोस्क्लेरोसिस;
• निचले छोरों की वैरिकाज़ नसों।

संक्रमण के विकास के लिए अनुकूल बाहरी परिस्थितियाँ:

• बंद गैर-हीड्रोस्कोपिक जूते;
• पैर की चोटें (कॉर्न्स, घर्षण);
• खेल।

एथलीट फुट के लक्षण वयस्क पुरुषों में सबसे आम हैं। बच्चे शायद ही कभी बीमार पड़ते हैं।

एथलीट फुट के लक्षण

रोग के विकास के साथ, त्वचा का छिलना और सूखापन, खुजली और जलन, विशेष रूप से इंटरडिजिटल रिक्त स्थान में, उंगलियों के नीचे दर्दनाक दरारें दिखाई देती हैं। कभी-कभी पैर के माइकोसिस के पहले लक्षण बुलबुले होते हैं जो कटाव के गठन के साथ फट जाते हैं। अक्सर रोग एक मिटाए हुए रूप में आगे बढ़ता है, उंगलियों के बीच की सिलवटों में केवल एक मामूली छीलने के रूप में प्रकट होता है, आटे जैसा दिखता है।

रोग के 4 नैदानिक ​​रूप हैं।

इंटरडिजिटल या इंटरट्रिजिनस वैरिएंट सबसे आम है। उंगलियों के बीच की त्वचा लाल हो जाती है, दरारें पड़ जाती हैं, सतह की परत गीली और परतदार हो जाती है। ये संकेत एकमात्र तक फैले हुए हैं, साथ हैं गंभीर खुजलीऔर जल रहा है। अक्सर बैक्टीरिया की सूजन से जुड़ा होता है।

स्क्वैमस-हाइपरकेराटोटिक वैरिएंट त्वचा के मोटे और फटने के साथ जुड़ा हुआ है। एकमात्र लाल और परतदार है। एड़ी क्षेत्र में गहरी दर्दनाक दरारें दिखाई देती हैं, खुजली आमतौर पर अस्वाभाविक होती है। अक्सर यह एक द्विपक्षीय घाव होता है, इसे "मोकासिन फुट" भी कहा जाता है।

डाइशिड्रोटिक प्रकार कई छोटे खुजली वाले दर्दनाक फफोले की उपस्थिति के साथ होता है। वे एक दूसरे के साथ विलीन हो जाते हैं, जिससे बड़े बुलबुले बनते हैं। फफोले के आवरण फट जाते हैं, एक चमकदार, कमजोर, दर्दनाक सतह - क्षरण को उजागर करते हैं। बाहरी अभिव्यक्तियाँ एक्जिमा से मिलती जुलती हैं।

अक्सर, माइक्रोबियल सूजन वंक्षण लिम्फ नोड्स, बुखार, पैर में दर्द, मतली, सिरदर्द और नशे के अन्य लक्षणों में वृद्धि के साथ जुड़ती है। डिहाइड्रोटिक रूप के साथ, कवक से एलर्जी अक्सर होती है - माइकोटिक एक्जिमा। यह शरीर के उन क्षेत्रों पर चकत्ते के साथ होता है जो कवक से संक्रमित नहीं होते हैं, उदाहरण के लिए, हाथों पर।

मिटाया गया संस्करण आमतौर पर अगोचर रूप से आगे बढ़ता है। इसके साथ अंगूठे और तर्जनी और / या अंगूठी और पैर की छोटी उंगलियों के बीच की त्वचा का हल्का सा छिलका होता है। खुजली अनुपस्थित है।

एथलीट फुट के लक्षण

पैरों के विभिन्न प्रकार के माइकोसिस स्वतंत्र रोग हो सकते हैं या शरीर के सामान्य फंगल संक्रमण के हिस्से के रूप में हो सकते हैं। कभी-कभी इन अंगों के शामिल होने से "दो पैर - एक हाथ" का संकेत मिलता है। शामिल हो सकते हैं onychomycosis - नाखून का कवक विनाश। कभी-कभी वंक्षण सिलवटें एक ही समय में पीड़ित होती हैं।

पैर के माइकोसिस के मुख्य लक्षण और उपचार फोटो में दिखाए गए हैं:

छीलने वाली त्वचा

त्वचा का रूखापन और फटना

बुलबुले और कटाव

निदान

एक अनुभवी त्वचा विशेषज्ञ पहली परीक्षा के दौरान पैरों के विभिन्न प्रकार के माइकोसिस को पहचान सकता है। हालांकि, निदान की पुष्टि करने के लिए सूक्ष्म परीक्षा आवश्यक है। इसके लिए, घाव से तराजू का उपयोग किया जाता है, एक स्पुतुला के साथ स्क्रैप किया जाता है और क्षार समाधान के साथ इलाज किया जाता है। परिणामी सामग्री की एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है और रोगजनकों का पता लगाया जाता है।

प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी तेज, सस्ता और प्रदर्शन करने में आसान है, लेकिन यह निर्धारित नहीं करता है कि किस प्रकार के कवक ने रोग का कारण बना है। इसलिए, सामग्री को पोषक माध्यम पर बोया जाता है, उसके बाद प्राप्त सामग्री का सांस्कृतिक अध्ययन किया जाता है। हालांकि, केवल 20-6% मामलों में माइक्रोस्कोप के तहत इसकी पहचान के बाद कवक की संस्कृति प्राप्त करना संभव है।

पैरों के माइकोसिस के उपचार के प्रकार

फंगल रोगों के उपचार के लिए दवाएं त्वचा विशेषज्ञ द्वारा निर्धारित की जानी चाहिए। आमतौर पर, पैर के माइकोसिस का उपचार बाहरी एजेंटों की मदद से किया जाता है।

में से एक प्रभावी दवाएंइस बीमारी में - क्लोट्रिमेज़ोल। हमारे स्टोर में आप इसे कम कीमत पर खरीद सकते हैं। दवानाखूनों और त्वचा के लिए क्लोट्रिमेज़ोल लोशन के रूप में उपकला के स्ट्रेटम कॉर्नियम की मोटाई में कवक के प्रजनन को रोकता है। यदि इंटरडिजिटल फोल्ड प्रभावित होते हैं, तो लोशन को पैरों की साफ, शुष्क त्वचा पर एक सप्ताह तक, यदि आवश्यक हो, लंबे समय तक दैनिक रूप से लगाया जाता है।

गंभीर केराटिनाइजेशन और त्वचा के टूटने के साथ, मृत त्वचा जमा को खत्म करना सबसे पहले आवश्यक है। इसके लिए एक्सफ़ोलीएटिंग दवाओं के उपयोग की आवश्यकता होती है। उदाहरण के लिए, सैलिसिलिक मरहम, लैक्टिक एसिड या यूरिया वाली क्रीम लिखिए। सींग वाले जमा को हटाने के बाद, लोशन को दिन में 1-2 बार लगाया जाता है।

एक डिहाइड्रोटिक संस्करण के साथ, पहले चरण में रोना कम करना आवश्यक है। इसके लिए टैनिन या बोरिक एसिड वाले लोशन का इस्तेमाल किया जाता है। गंभीर मामलों में, ग्लूकोकार्टिकोइड एजेंटों को उपचार में जोड़ा जाता है। फिर सामान्य तरीके से क्लोट्रिमेज़ोल लोशन लगाएं।

मिटाए गए रूप के साथ, पैरों को दिन में एक बार 7 से 10 दिनों के लिए लोशन के साथ इलाज किया जाता है, लेकिन पाठ्यक्रम की अवधि व्यक्तिगत होती है और डॉक्टर द्वारा निर्धारित की जाती है।

प्रणालीगत चिकित्सा

लंबे समय तक या बार-बार होने वाले एथलीट फुट के लिए, आपको मुंह से ऐंटिफंगल दवाएं लेने की आवश्यकता हो सकती है। वे जठरांत्र संबंधी मार्ग से रक्तप्रवाह में गुजरते हैं, और फिर त्वचा में, जहां वे कवक को नष्ट करते हैं। तीन मुख्य दवाओं का उपयोग किया जाता है:

• फ्लुकोनाज़ोल;
• इट्राकोनाज़ोल;
• टेरबिनाफाइन

इन फंडों को लेने की अवधि कम से कम एक महीने की होती है। इनकी कीमत काफी ज्यादा होती है। इसलिए, पैर के माइकोसिस को रोकना हमेशा इसे ठीक करने की तुलना में आसान और अधिक लाभदायक होता है।

प्रणालीगत दवाएं विशेष रूप से अक्सर निर्धारित की जाती हैं यदि कवक ने न केवल त्वचा, बल्कि नाखूनों को भी प्रभावित किया है। इस मामले में, नाखून प्लेट के बढ़ते हिस्से में दवाएं जमा हो जाती हैं, और एक स्वस्थ नाखून धीरे-धीरे बढ़ता है। प्रभाव में सुधार करने के लिए, नाखून को पूरी तरह से शल्य चिकित्सा से हटाया जा सकता है, जिसके बाद इसे कवक के बिना बहाल किया जाता है।

बुजुर्ग रोगियों में नाखून हटाने, प्रणालीगत और स्थानीय एंटिफंगल चिकित्सा का संयोजन विशेष रूप से अक्सर आवश्यक होता है। रोगियों के इस समूह में, नाखून अक्सर धीरे-धीरे बढ़ते हैं, पैरों में रक्त परिसंचरण गड़बड़ा जाता है, इसलिए प्रभाव को प्राप्त करने के लिए दवाओं की एक बड़ी खुराक और उपचार के एक लंबे पाठ्यक्रम की आवश्यकता होती है।

लोक उपचार के साथ उपचार

केवल व्यंजनों को लागू करना पारंपरिक औषधिकवक से छुटकारा पाने में मदद नहीं करेगा। हालांकि, पारंपरिक चिकित्सा के अलावा यह उपचार के पाठ्यक्रम को छोटा करता है और वसूली को गति देता है।

हर शाम 10 मिनट के लिए गर्म पैर स्नान करना उपयोगी होता है, फिर पैरों को एक तौलिये से अच्छी तरह से पोंछ लें, विशेष रूप से पैर की उंगलियों के बीच, और नाखूनों और त्वचा के लिए क्लोट्रिमेज़ोल हीलिंग लोशन लगाएं। उपयोगी स्नान सामग्री जो सूजन से राहत देती है और खुजली को कम करती है:

• जड़ी बूटी केलैंडिन और सेंट जॉन पौधा;
• बोझ की जड़ें;
• कीड़ा जड़ी घास;
• युकलिप्टस की पत्तियाँ;
• प्राथमिकी सुई;
• पीसा हुआ ग्राउंड कॉफी से ताजा मैदान;
• नमक;
• कद्दूकस किया हुआ मिश्रण कपड़े धोने का साबुन, बेकिंग सोडा, पोटेशियम परमैंगनेट और सरसों का पाउडर।

प्रभावित क्षेत्रों को लहसुन के कुचले हुए सिर के साथ मिश्रित 100 ग्राम मक्खन से बर्च टार या स्वयं तैयार मलम के साथ चिकनाई की जा सकती है। प्रोपोलिस भी उपयोगी है, जिसे नाखूनों में दर्द के लिए बांधा जा सकता है।

प्राकृतिक उपचार से सेक बनाना उपयोगी है। सबसे पहले, उन्हें 1 - 2 घंटे के लिए छोड़ दिया जाता है, और अच्छी सहनशीलता के साथ - रात भर। निम्नलिखित सामग्री का उपयोग किया जाता है:

• कद्दू का गूदा;
• कुचल काली मूली के बीज;
• पुदीना, नमक के साथ जमीन;
• burdock या रोवन के पत्ते, एक रोलिंग पिन के साथ थोड़ा नरम।

कुछ पौधों के रस और अन्य प्राकृतिक उपचारों के साथ प्रभावित क्षेत्रों का स्नेहन प्रभावी होता है:

• प्रोपोलिस का शराब समाधान;
• प्याज या लहसुन का रस;
• कलैंडिन का रस;
• चाय के पेड़ की तेल।

रोग प्रतिरक्षण

माइकोसिस से बचने या इसकी पुनरावृत्ति को रोकने के लिए, आपको एक सरल लेकिन निरंतर रोकथाम की आवश्यकता है:

• गर्मियों में, प्राकृतिक सामग्री से बने सांस के जूते पहनें;
• स्विमिंग पूल, स्नानागार, सार्वजनिक शावर का दौरा करते समय, अलग-अलग रबर की चप्पलें पहनें;
• किसी और के जूते न पहनें, उदाहरण के लिए, किसी पार्टी में;
• केवल अपने स्वयं के स्वच्छता उपकरणों का उपयोग करें - कैंची, झांवा, नाखून फाइल।

पुन: संक्रमण से बचने के लिए, इनसोल और जूतों की भीतरी सतह को नियमित रूप से कीटाणुनाशक से उपचारित करना चाहिए। ज्ञात लोक नुस्खा- सिरका सार का एक समाधान, लेकिन इसमें तेज अप्रिय गंध है।

डॉक्टर माइकोस्प्रे के उपयोग की सलाह देते हैं, जिसमें न केवल एक एंटिफंगल है, बल्कि एक जीवाणुरोधी प्रभाव भी है। माइकोस्प्रे न केवल जूतों के उपचार के लिए, बल्कि पैरों की सुरक्षा के लिए सार्वजनिक स्थानों पर जाने से पहले पैरों पर लगाने के लिए भी बहुत अच्छा है।

मास्को और क्षेत्रों के निवासी एथलीट फुट के इलाज के लिए और इसकी रोकथाम के लिए हमारे ऑनलाइन स्टोर में दवाएं खरीद सकते हैं। वे प्रभावी और सुरक्षित साबित हुए हैं। उनके उपयोग की सिफारिश उन सभी लोगों के लिए की जाती है जो पैर के फंगस से संक्रमित नहीं होना चाहते हैं या इससे जल्दी छुटकारा पाना चाहते हैं।

2. रोग संबंधी सामग्री की प्रयोगशाला परीक्षा

2.1. सूक्ष्म अध्ययन

कवक के रूपात्मक तत्वों का पता लगाने के लिए - यीस्ट कोशिकाएं, स्यूडोमाइसीलियम, मायसेलियम, कोनिडियोफोर्स, कोनिडिया, गहरे मायकोसेस के ऊतक रूप - देशी और दागदार तैयारी में रोग संबंधी सामग्री की जांच की जाती है।

तरल रोग संबंधी सामग्री की जांच निम्नलिखित स्पष्ट तरल पदार्थों में एक अस्थिर अवस्था में की जाती है: शराब और ग्लिसरीन का मिश्रण (एथिल अल्कोहल 1 एच, ग्लिसरीन 2 एच, आसुत जल 2 एच), लुगोल का घोल (क्रिस्टलीय आयोडीन का 1 ग्राम, पोटेशियम का 2 ग्राम) आयोडाइड, 150 मिली पानी), साथ ही पानी या खारा में। देशी तैयारी तैयार करने के लिए, सामग्री की एक बूंद को एक लूप या पिपेट के साथ कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, फिर एक समाशोधन तरल की 1-2 बूंदें, एक कवर पर्ची के साथ कवर किया जाता है और 1:80 के कम आवर्धन पर सूक्ष्मदर्शी किया जाता है (ऐपिस 10x और उद्देश्य 8x), जिस पर खमीर कोशिकाओं के समूह, स्यूडोमाइसीलियम देखे जा सकते हैं, मायसेलियम और मशरूम के अन्य तत्व। 1:400 के उच्च आवर्धन पर, अलग-अलग कोशिकाओं की विशेषता हो सकती है।

घने रोग संबंधी सामग्री (त्वचा, नाखून तराजू) को 10-20% KOH समाधान की एक बूंद में रखा जाता है, एक बर्नर लौ (बेहतर मैक्रेशन के लिए) पर थोड़ा गर्म किया जाता है जब तक कि क्षार क्रिस्टल बूंद की परिधि के साथ दिखाई नहीं देते। फिर ड्रॉप को एक कवर स्लिप के साथ कवर किया जाता है, उस पर थोड़ा दबाया जाता है और सूक्ष्मदर्शी किया जाता है, पहले फ्लेक को खोजने के लिए कम आवर्धन के तहत, फिर उच्च आवर्धन पर।

बालों की सामग्री में, बालों (एक्टोथ्रिक्स) या बालों के भीतर (एंडोट्रिक्स) के आसपास के बीजाणुओं का आवरण, कवक तत्व आमतौर पर बहुत स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं। बालों के घाव, जैसे बीजाणु आकार, विशिष्ट हैं विभिन्न प्रकारडर्माटोफाइट्स। कवक संरचनाओं और कलाकृतियों के बीच विभेदक निदान की आवश्यकता है। झूठे सकारात्मक परिणामों के संभावित स्रोत लिपिड बूंदें, हवा के बुलबुले, कपड़ा फाइबर और तथाकथित "मोज़ेक मशरूम" हैं। लिपिड की बूंदें खमीर कोशिकाओं की तरह दिख सकती हैं, और इस तरह के निष्कर्ष खराब स्पष्ट सामग्री में सबसे आम हैं। कपड़ा फाइबर आमतौर पर एपिडर्मिस, बाल या नाखून की सामग्री से अलग होते हैं। वे कवक के हाइपहे से बड़े होते हैं, असमान मोटाई के होते हैं, और उनमें सेप्टा नहीं होता है। "मोज़ेक मशरूम" तैयारी के अत्यधिक ताप के साथ KOH के क्रिस्टलीकरण की प्रक्रिया में प्राप्त एक कलाकृति है। कवक के विपरीत, स्पष्ट कोशिका विभाजन परिभाषित नहीं होते हैं।

फंगल संक्रमण के निदान में एक महत्वपूर्ण कदम दागदार तैयारी की तैयारी है। किसी भी रोग संबंधी सामग्री (स्मीयर्स, अंग प्रिंट, सेंट्रीफ्यूज और, ज़ाहिर है, हिस्टोलॉजिकल सेक्शन) को तीन मुख्य प्रकार के प्रसंस्करण से गुजरना होगा: 1) असली कवक की पहचान करने के लिए पीएएस विधि से धुंधला हो जाना - यूमाइसेट्स; 2) ग्राम विधि के अनुसार या ग्राम-वीगर्ट के अनुसार संशोधनों में, बोगोलेपोव के अनुसार, ब्राउन-ब्रेना के अनुसार - संबंधित जीवाणु माइक्रोबायोटा की पहचान करने के लिए, एक्टिनोमाइसेट्स और नोकार्डिया का पता लगाने के लिए; 3) ज़िहल-नील्सन विधि के अनुसार धुंधला हो जाना या किग्नन विधि के अनुसार संशोधन - एसिड प्रतिरोधी सूक्ष्मजीवों का पता लगाने के लिए, मुख्य रूप से माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस के साथ संकेत और भेदभाव के लिए, कुष्ठ रोग, नोकार्डिया और बीजाणु-गठन के प्रेरक एजेंटों का पता लगाने के लिए खमीर

पीएएस-विधि (शिफ-आयोडिक एसिड) में सूक्ष्मजीवों की दीवारों में तटस्थ पॉलीसेकेराइड का पता लगाना शामिल है। अधिकांश यूमाइसेट्स की दीवारों में अलग-अलग सांद्रता में एक ग्लूकेन-मन्नान कॉम्प्लेक्स होता है, जिसके कारण धुंधला हो जाता है।

प्रोकैरियोट्स (बैक्टीरिया) पीएएस-नकारात्मक हो जाते हैं, जिसमें माइकोलॉजिस्ट के लिए एक्टिनोमाइसेट्स और नोकार्डिया ऑफ इंटरेस्ट शामिल हैं। हालांकि, एक्टिनोमाइकोटिक ड्रूसन के निर्माण के दौरान, तथाकथित "सीमेंट" बनता है, जो वनस्पति एक्टिनोमाइकोटिक मायसेलियम को एक ग्रेन्युल में चिपका देता है, जो एक पीएएस-पॉजिटिव रंग भी देता है। इस संबंध में, यह विधि एक्टिनोमाइकोसिस के निदान में भी लागू होती है।

पीएएस प्रतिक्रिया (और इसका संशोधन) फंगल संक्रमण के ऊतक रूपों के निदान के लिए सबसे महत्वपूर्ण तरीका है। विधि आयोडिक या क्रोमिक एसिड के साथ कार्बोहाइड्रेट के ग्लाइकोल समूहों के ऑक्सीकरण पर आधारित है। आयोडिक एसिड 1,2 और 1,4 ग्लाइकोल को एल्डिहाइड में ऑक्सीकृत करता है और हाइड्रॉक्सिल-असर कार्बन परमाणुओं के बीच के बंधन को तोड़ता है। एल्डिहाइड शिफ अभिकर्मक का उपयोग करके एल्डिहाइड समूहों का भी पता लगाया जा सकता है। सीटू में, कवक की दीवारों में, हेटरोपॉलीसेकेराइड परिसर एक बैंगनी-लाल रंग (विधि - परिशिष्ट देखें) में तीव्रता से रंगा हुआ है।

आसपास के ऊतकों के रंग को दबाने के लिए, हल्के हरे, मिथेनिल पीले, आदि के साथ उपचार ("काउंटर-पेंटिंग") का उपयोग किया जाता है। इस मामले में, केवल कवक कोशिकाओं का पता लगाया जाता है, जो ऊतकों में या स्मीयर तैयारियों में रोगज़नक़ संकेत के चरण में बहुत उपयोगी होता है। साथ ही, ऐसी तैयारी के लिए शरीर की प्रतिक्रिया और ऊतक परिवर्तन का न्याय करना संभव नहीं है। पीएएस विधि से सना हुआ समानांतर स्लाइड्स और हेमटॉक्सिलिन के साथ काउंटरस्टैन्ड होना हमेशा आवश्यक होता है।

व्यवहार में, न केवल पीएएस विधि के शास्त्रीय संस्करण का उपयोग किया जाता है, बल्कि इसके विभिन्न संशोधन भी होते हैं: क्रोमिक एसिड (आयोडिक एसिड के बजाय) के साथ ऑक्सीकरण बाउर प्रतिक्रिया है, ग्रिडली धुंधला हो जाना, गोमोरी-ग्रोकॉट विधि द्वारा मिथेनामाइन चांदी संसेचन। उन सभी का सफलतापूर्वक कवक के ऊतक रूपों का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, और वे एक ही सिद्धांत पर आधारित होते हैं (तकनीक - परिशिष्ट देखें)। टेबल तीन।

टेबल तीन

मशरूम के ऊतक रूपों के टिंक्टोरियल गुण

(रोग संबंधी सामग्री में, ऊतकीय वर्गों में)

यदि क्रिप्टोकॉकोसिस का निदान माना जाता है, तो कैप्सुलर सामग्री की विशिष्ट पहचान के लिए विधियों का उपयोग करने की सलाह दी जाती है। Cr.neoformansग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स (एसिड पॉलीसेकेराइड) युक्त। इस प्रयोजन के लिए, एल्कियन ब्लू स्टेनिंग (माउरी विधि के अनुसार), बेसिक ब्राउन (शुबिच विधि के अनुसार), म्यूसीकारमाइन के साथ धुंधला का उपयोग किया जाता है। ट्रिपल धुंधला बहुत उपयोगी है: पीएएस प्रतिक्रिया, फिर एलिसियन ब्लू के साथ उपचार, फिर हेमेटोक्सिलिन के साथ। इस मामले में, क्रिप्टोकोकी और समान आकारिकी वाले अन्य कवक के ऊतक रूपों के बीच अंतर संभव हो जाता है।

रोग संबंधी सामग्री (हिस्टोलॉजिकल तैयारी) के विवरण में आकृति विज्ञान और कवक के ऊतक रूपों के आकार, उनकी टिंचोरियल विशेषताओं, मेजबान ऊतकों के साथ उनके संबंध, फागोसाइटोसिस की उपस्थिति, और साथ में माइक्रोबायोटा का निर्धारण शामिल है।

2.2. खमीर कवक के कारण मायकोसेस में रोग संबंधी सामग्री की बुवाई और कोशिकाओं की मात्रात्मक लेखांकन

कवकों की कल्चर प्राप्त करना उनकी पहचान और ऐंटिफंगल दवाओं के प्रति संवेदनशीलता के निर्धारण के लिए आवश्यक है।

अध्ययन से पहले थूक को बाँझ मोतियों से हिलाकर 5-10 मिनट के लिए समरूप बनाया जाता है। यदि थूक में बहुत अधिक बलगम होता है और खराब रूप से समरूप होता है, तो इसमें 1-2 मिलीलीटर बाँझ खारा मिलाया जा सकता है। देशी या दागदार तैयारियों में थूक की सूक्ष्म जांच की जाती है। यदि कवक के तत्व उच्च आवर्धन के साथ थूक की माइक्रोस्कोपी के दौरान देखने के क्षेत्र में दिखाई देते हैं, तो इसे 1:10, 1:100, 1:1000 के तनुकरण में बोया जाना चाहिए, यदि कवक के तत्वों का पता नहीं चलता है, थूक को बिना पतला किए बोया जाता है। तरल पोषक माध्यम (पौधा, सबौराड, 1% पेप्टोन पानी) या बाँझ खारा में पतला तैयार किया जाता है। प्रत्येक कमजोर पड़ने से, 0.1 मिली को जीवाणुरोधी एंटीबायोटिक दवाओं - पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन, बायोमाइसिन (100-200 यूनिट / एमएल मध्यम) के साथ 2 कप वोर्ट अगर, सबौराड अगर या एमपीए के लिए एक स्पैटुला के साथ टीका लगाया जाता है। पोषक माध्यम को पहले थर्मोस्टेट में +37 C पर सुखाया जाता है, क्योंकि घनीभूत की उपस्थिति में, उपनिवेशों के विकास में एक मिला हुआ चरित्र हो सकता है। फसलों को थर्मोस्टेट में +37 डिग्री सेल्सियस पर 48 घंटों के लिए ऊष्मायन किया जाता है। फिर, यदि एक ही प्रकार की खमीर कॉलोनियों की वृद्धि होती है, तो उन्हें मात्रात्मक रूप से दर्ज किया जाता है। परीक्षण सामग्री के 1 मिलीलीटर या 1 ग्राम में खमीर कोशिकाओं (एन) की संख्या की गणना सूत्र एन = एब्स के अनुसार की जाती है, जहां एक पेट्री डिश पर कॉलोनियों की औसत संख्या है, बी = 10 एक टीकाकरण के साथ 0.1 मिलीलीटर की मात्रा, सी उत्सर्जन कमजोर पड़ने की डिग्री (10,100,1000) है।

गणना उदाहरण: 1:1000 के कमजोर पड़ने के साथ प्लेटों पर औसतन 60 कालोनियों का विकास हुआ, जबकि परीक्षण उत्सर्जन के 1 मिलीलीटर में 60 x 10 x 1000 = 600,000 खमीर कोशिकाएं होती हैं।

BAL, ब्रांकाई, मैक्सिलरी कैविटी, पित्त (भाग ए, बी, सी), गैस्ट्रिक जूस, ग्रहणी सामग्री, मूत्र का फ्लशिंग तरल अपकेंद्रित्र ट्यूबों में स्थानांतरित किया जाता है और 10-15 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, जिसके बाद सतह पर तैरनेवाला एक त्वरित आंदोलन के साथ निकल जाता है . माइक्रोस्कोपी के लिए देशी तैयारी तलछट से तैयार की जाती है। यदि माइक्रोस्कोपी के दौरान प्रत्येक क्षेत्र में खमीर कोशिकाएं पाई जाती हैं, तो ठोस पोषक मीडिया पर 1:100 और 1:1000, 0.1 मिलीलीटर प्रत्येक के कमजोर पड़ने पर टीकाकरण किया जाता है और 48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। यदि खमीर कोशिकाएं तलछट की माइक्रोस्कोपी के दौरान पता नहीं लगाया जाता है, बिना प्रजनन के बोया गया तलछट। खमीर वनस्पतियों की मात्रा की गणना प्रति 1 मिलीलीटर रोग सामग्री में की जाती है।

FAECES को 0.2 ग्राम की मात्रा में मापने वाले चम्मच से लिया जाता है, 1.8 मिलीलीटर तरल पौधा में रखा जाता है और कांच की छड़ से अच्छी तरह से हिलाया जाता है। परिणामी कमजोर पड़ने (1:10) को 5-10 मिनट तक खड़े रहने की अनुमति है, 1:100, 1:1000 के कमजोर पड़ने को तैयार किया जाता है और अगर माध्यम के साथ प्रति 2 पेट्री डिश में 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में टीका लगाया जाता है। प्रति 1 ग्राम मल में उत्पादित खमीर वनस्पतियों की मात्रा के लिए लेखांकन।

मस्तिष्कमेरु द्रव। इसकी उपस्थिति को चिह्नित करें (पारदर्शी या बादल, रंगहीन या रंगीन, रक्त अशुद्धियों की उपस्थिति, तलछट)। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद सीएसएफ तलछट से सूक्ष्म स्मीयर। तीन तैयारियां तैयार की जाती हैं: देशी - बाँझ खारा समाधान की एक बूंद में: देशी - स्याही की एक बूंद में और पीएएस विधि के साथ धुंधला होने के लिए एक धब्बा, ग्राम के अनुसार और मावरी के अनुसार एलिसियन ब्लू।

माइक्रोस्कोपी मस्तिष्कमेरु द्रवदेशी और दागदार तैयारियों में, यह खमीर नवोदित कोशिकाओं और कवक के मायसेलियम के टुकड़े, या बैक्टीरिया जो प्युलुलेंट मेनिन्जाइटिस (मेनिंगोकोकस, न्यूमोकोकस, हीमोफिलस इन्फ्लुएंजा, आदि) का कारण बनता है, की उपस्थिति स्थापित करने की अनुमति देता है। शव की तैयारी में कैप्सुलर कवक का पता लगाया जा सकता है क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स।उसी समय, कैप्सूल के हल्के प्रभामंडल से घिरी नवोदित खमीर कोशिकाएं शव की धूसर पृष्ठभूमि के विरुद्ध दिखाई देती हैं। स्याही की तैयारी में खमीर के रूप भी हो सकते हैं कैनडीडा अल्बिकन्सकोशिका के चारों ओर एक हल्के प्रभामंडल के बिना कैप्सूल।

करोड़। नियोफ़ॉर्मन्सएलिसियन ब्लू (माउरी के अनुसार) के साथ धुंधला करके भी पता लगाया जा सकता है। धुंधलापन कैप्सुलर हेटरोपॉलीसेकेराइड विशेषता के चयनात्मक पता लगाने के कारण होता है Cr.neoformans. यदि ग्राम-दाग वाली तैयारी में एक जीवाणु वनस्पति का पता लगाया जाता है, तो मस्तिष्कमेरु द्रव की आगे की जांच उपयुक्त जीवाणु विज्ञान विधियों के अनुसार की जाती है। तलछट की माइक्रोस्कोपी के बाद, तरल को 3 कप ताजा तैयार, सूखे वोर्ट अगर या सबौरौद अगर के साथ-साथ तरल पौधा या सबौराड तरल माध्यम पर टीका लगाया जाता है। तरल तलछट की 2-3 बूंदों को प्लेट 1 और 2 के पोषक तत्व अगर की सतह पर लगाया जाता है और ध्यान से एक स्पैटुला से रगड़ा जाता है, और 1 बूंद को फिलामेंटस कवक का पता लगाने के लिए प्लेट 3 के अगर की सतह पर टीका लगाया जाता है। शेष तरल को 5 मिलीलीटर तरल पौधा या सबौरौद अगर में स्थानांतरित किया जाता है। फसलें दो तापमान स्थितियों पर उगाई जाती हैं: कप 1 - +37 o C पर, और कप 2 और 3 और एक तरल माध्यम पर बुवाई - +28 o C - +30 o C पर। +37 o C के तापमान पर फसलें होती हैं 2 और 5 दिन, और 28 - 30 पर सी के बारे में - विकास के 4 वें, 7वें, 10वें दिन देखा गया। यदि 5 दिन +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर और 10 दिन 28-30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कोई वृद्धि नहीं देखी जाती है, तो प्लेटों पर एक तरल पोषक माध्यम से पौधा या सबौरौद अगर के साथ टीकाकरण किया जाता है। खमीर वनस्पतियों के विकास की अनुपस्थिति में, तरल की संस्कृति का परिणाम नकारात्मक के रूप में दर्ज किया जाता है।

डिस्चार्ज करने योग्य फिस्टुलस। अध्ययन की शुरुआत देशी या दागदार तैयारियों में सामग्री की माइक्रोस्कोपी से होती है। फिर, सामग्री को एक अगर माध्यम (वॉर्ट या सबौराड) पर टीका लगाया जाता है, जिसके लिए डिस्चार्ज की 2-3 बूंदों को कप पर लगाया जाता है और एक स्पैटुला के साथ अगर की सतह पर फैला दिया जाता है। टीकाकरण 48 घंटे के लिए +37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है।

डिस्चार्ज करने योग्य म्यूकोसा।

1. स्वाब को एक परखनली में 2 मिली तरल माध्यम (wort, Sabouraud's Medium या MPB) के साथ रखा जाता है और स्टॉपर को भिगोए बिना 5-7 मिनट तक हिलाया जाता है। 1:10, 1:100 के तनुकरण तैयार किए जाते हैं और प्रत्येक तनुकरण के 0.1 मिली को पौधा अगर, सबौरौद अगर या एमपीए की दो प्लेटों में टीका लगाया जाता है। सॉलिड मीडिया पर टीके और एक तरल माध्यम के साथ एक स्वाब (संवर्धन के लिए) के साथ एक टेस्ट ट्यूब +37 सी के तापमान पर ऊष्मायन किया जाता है। 48 घंटों के बाद, कॉलोनियों की संख्या की गणना की जाती है और एक स्वाब के साथ ली गई खमीर कोशिकाओं की संख्या होती है लगभग निर्धारित। ऐसा करने के लिए, बढ़ी हुई खमीर कॉलोनियों की संख्या को 20 से गुणा और पतला किया जाता है। तनुकरण से ली गई प्लेटों पर कॉलोनी की वृद्धि के अभाव में, संवर्धन माध्यम से एक प्लेट पर पौधा अगर के साथ फिर से बोया जाता है।

2. संस्कृति माध्यम की सतह पर स्वाब रोटेशन द्वारा टीकाकरण किया जा सकता है। इसी समय, खमीर कालोनियों की संख्या को ध्यान में नहीं रखा जाता है, लेकिन केवल विकास की उपस्थिति और तीव्रता पर ध्यान दिया जाता है: एकल उपनिवेश, महत्वपूर्ण या निरंतर विकास, माइक्रोबायोटा विकास की कमी।

रक्त। रक्त संवर्धन के लिए शिरापरक रक्त के नमूनों को कम से कम 1:5 संवर्धन माध्यम से पतला किया जाना चाहिए ताकि रक्त के जीवाणुनाशक गुण कवक के विकास को बाधित न करें। एक पोषक माध्यम के 50-100 मिलीलीटर में क्रमशः 5-10 मिलीलीटर ताजा रक्त बोएं (इसके पुनर्जनन के बाद 2% ग्लूकोज या किट-टारोज़ी माध्यम के साथ तरल सबौराड)। बुवाई के लिए, आप एक थक्कारोधी (1:10 5% सोडियम साइट्रेट घोल) के साथ रक्त ले सकते हैं। फसलें 10 दिनों के लिए +37 डिग्री सेल्सियस पर उगाई जाती हैं और 5 और 10 दिनों में नियंत्रण बुवाई की जाती है। तलछट एक बाँझ पिपेट के साथ लिया जाता है, जिसमें से 3 बूंदों को पेट्री डिश में वोर्ट-अगर की सतह पर बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ बोया जाता है। बीज वाले कपों को थर्मोस्टैट में 2-5 दिनों के लिए +37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रखा जाता है। खमीर वनस्पतियों के विकास के मामले में, रक्त में कवक की उपस्थिति के बारे में प्रारंभिक उत्तर दिया जाता है, और संस्कृति जीनस और प्रजातियों के लिए निर्धारित होती है।

माइकोफ्लोरा के लिए रक्त संवर्धन की एक अन्य विधि का वर्णन किया गया है (H.Rieth)। ऐसे में 5-10 मिली रक्त का टीका बूंदों में लगाया जाता है। रक्त की 40-50 बूंदों को एक पेट्री डिश में एक बाँझ पिपेट के साथ, बूंदों के बीच 0.5 सेमी की दूरी पर घने पोषक माध्यम की सतह पर लगाया जाता है। बुवाई दो पेट्री डिश पर की जाती है, एक डिश में +37 o C के तापमान पर और दूसरे में कमरे के तापमान पर 2-5 दिनों के लिए सेते हैं।

अंग के ऊतकों के टुकड़े। पेट्री डिश में घने पोषक माध्यम की सतह पर अध्ययन के तहत ऊतक के एक टुकड़े के साथ एक छाप बनाई जाती है, फिर एक लूप को छलनी किया जाता है। ऊतक का एक ही टुकड़ा तरल पोषक माध्यम (पौधे, सबौराउड माध्यम) के 50 मिलीलीटर में रखा जाता है। 5 दिनों के लिए +37 C के तापमान पर थर्मोस्टैट में फसलों को इनक्यूबेट किया जाता है।

त्वचा और नाखून तराजू। माइक्रोस्कोपी के परिणामों की परवाह किए बिना उत्पादित बुवाई तराजू। ऐसा करने के लिए, एक बाँझ माइकोलॉजिकल स्पैटुला के साथ, माध्यम के घनीभूत में सिक्त, तराजू को एक परखनली में 2-3 बिंदुओं पर एक बेवेल्ड वोर्ट-अगर पर स्थानांतरित किया जाता है, जिससे उन्हें माध्यम की सतह पर दबाया जाता है। अध्ययन के लिए प्राप्त सामग्री की मात्रा के आधार पर 2-3 परखनलियों में बुवाई की जाती है। फसलों को थर्मोस्टैट में 28-37 C के तापमान पर 5 दिनों तक इनक्यूबेट किया जाता है।

तेजी से पहचान के तरीकों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है C.albicans. यह प्रजाति रक्त सीरम, अंडे की सफेदी, ईगल के माध्यम पर, 199 माध्यम, आदि पर कई घंटों (37 डिग्री सेल्सियस पर 2-4 घंटे) के भीतर स्यूडोमाइसीलियम के रोगाणु ट्यूब और छोटे फिलामेंट्स बनाने में सक्षम है। व्यवहार में, प्रयोगशालाएं मानव सीरम (सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं से बनी हुई हैं) का उपयोग करती हैं, जहां 37 डिग्री सेल्सियस पर जर्मिनल ट्यूब बनते हैं, और 24 घंटे के बाद स्यूडोमाइसीलियल टेंगल्स। तरह के लिए C.albicansयह घटना 90% मामलों में विशिष्ट है। शायद ही कभी, अंकुर बनते हैं सी उष्णकटिबंधीय।

2.3. फफूंदी के कारण होने वाले संदिग्ध मायकोसेस के मामले में सूक्ष्म परीक्षण और रोग संबंधी सामग्री की बुवाई

पैथोलॉजिकल सामग्री की जांच देशी और दागदार तैयारियों में की जा सकती है। माइक्रोप्रेपरेशन की तैयारी के लिए इच्छित स्लाइड और कवरस्लिप्स को माइकोबायोटा के साथ हवा के संदूषण से बचने के लिए अल्कोहल और ईथर (1:1) के मिश्रण में संग्रहित किया जाना चाहिए। उपयोग करने से पहले, स्लाइड्स और कवरस्लिप्स को बर्नर की लौ पर निष्फल कर दिया जाता है।

सामग्री माइक्रोस्कोपी

थूक की माइक्रोस्कोपी। देशी तैयारी की तैयारी के लिए, थूक को एक बाँझ पेट्री डिश में स्थानांतरित किया जाता है और छोटे कणों (गांठ) का पता लगाने के लिए एक काली पृष्ठभूमि के खिलाफ जांच की जाती है। गांठ प्युलुलेंट, प्यूरुलेंट-श्लेष्म, प्यूरुलेंट-खूनी हो सकती है। गांठ का आकार 0.3-3 मिमी व्यास के भीतर आकार में भिन्न होता है, उनका रंग ग्रे, पीला, हरा हो सकता है। देशी माइक्रोप्रेपरेशन तैयार करने के लिए, व्यक्तिगत गांठ को विदारक सुइयों या बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ ग्लिसरीन के साथ शराब की एक बूंद में या 10% KOH समाधान की एक बूंद में स्थानांतरित किया जाता है। एक कवरस्लिप के साथ कवर करें, कम (1:80, 10x ऐपिस और 8x उद्देश्य) और उच्च (1:400, 10x ऐपिस और 40x उद्देश्य) माइक्रोस्कोप आवर्धन पर एक विदारक सुई और माइक्रोस्कोप के साथ हल्के से दबाएं।

धोने, एक्सयूडेट, साथ ही पित्त, मूत्र, गैस्ट्रिक जूस, मस्तिष्कमेरु द्रव से तैयारी देशी तलछट से या सेंट्रीफ्यूजेशन (5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर) के परिणामस्वरूप प्राप्त तलछट से तैयार की जाती है। अवक्षेप को लूप या पाश्चर पिपेट के साथ कांच की स्लाइड पर 10% KOH विलयन की एक बूंद में स्थानांतरित किया जाता है, एक आवरण पर्ची के साथ कवर किया जाता है और सूक्ष्मदर्शी के निम्न और उच्च आवर्धन पर जांच की जाती है।

सना हुआ तैयारी तैयार करने के लिए, अध्ययन की गई गांठ या तलछट की एक बूंद को समान रूप से विदारक सुइयों या एक छोटी कांच की स्लाइड के साथ एक बाँझ स्लाइड की सतह पर वितरित किया जाता है जब तक कि एक पतली धब्बा प्राप्त न हो जाए। परिणामी स्मीयर को हवा में सुखाया जाता है, मिथाइल अल्कोहल या निकिफोरोव (96% एथिल अल्कोहल और ईथर के बराबर भागों) के मिश्रण के साथ 3-5 मिनट के लिए तय किया जाता है, या एक बर्नर लौ पर तीन बार आग लगा दी जाती है। फिक्स्ड स्मीयर को ग्राम, पीएएस विधि, सफेद कैल्कोफ्लोर द्वारा दाग दिया जाता है। सना हुआ तैयारी एक विसर्जन माइक्रोस्कोप प्रणाली (1:900, ऐपिस 10x, उद्देश्य 90x) का उपयोग करके सूक्ष्मदर्शी है।

बुवाई सामग्री

फिलामेंटस कवक के लिए किसी भी रोग संबंधी सामग्री की जांच करते समय, इसे पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन (100-200 यूनिट / एमएल माध्यम) के साथ घने सबौराउड माध्यम या पौधा पर टीका लगाया जाता है। कप के केंद्र में हमेशा 3 बिंदुओं पर बढ़ते फिलामेंटस कवक (+37 डिग्री सेल्सियस और +28 डिग्री सेल्सियस) के लिए अलग-अलग तापमान की स्थिति को ध्यान में रखते हुए, दो पुनरावृत्तियों में बुवाई की जाती है। ऊष्मायन समय 4-5 दिन है।

थूक (चयनित गांठ) को बैक्टीरियोलॉजिकल लूप या पाश्चर पिपेट के साथ सबौराउड माध्यम या पौधा की सतह पर स्थानांतरित किया जाता है। टीका लगाने के स्थान को पेट्री डिश के तल के पीछे की ओर एक पेंसिल से चिह्नित किया गया है। वरीयता प्राप्त पेट्री डिश को ढक्कन के साथ थर्मोस्टेट में रखा जाता है।

ऊष्मायन की एक निश्चित अवधि के बाद, बीज वाले कपों की जांच की जाती है और यदि स्पोरुलेशन का पता चलता है, तो कवक की संस्कृति निर्धारित की जाती है। स्पोरुलेशन की अनुपस्थिति में, कवक को आगे की पहचान के लिए Czapek के विभेदक माध्यम पर उपसंस्कृत किया जाता है।

ब्रोन्कियल धुलाई, मैक्सिलरी कैविटी, एक्सयूडेट, मूत्र, गैस्ट्रिक जूस (देशी या सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद) का तलछट एक पिपेट के साथ लिया जाता है और 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में टीका लगाया जाता है। तरल Sabouraud माध्यम या तरल बाँझ आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान में मल को 1:10 (1 ग्राम मल और 9 मिलीलीटर तरल) पतला किया जाता है, पायसीकारी, बड़े कणों को अवक्षेपित करने के लिए 10 मिनट के लिए व्यवस्थित किया जाता है, 0.1 मिलीलीटर की मात्रा में एक सतह पर तैरनेवाला के साथ टीका लगाया जाता है। . वियोज्य बाहरी श्रवण नहर और ग्रसनी, एक स्वाब के साथ ली गई, बोई जाती है, पोषक माध्यम की सतह पर स्वाब के प्रत्येक पक्ष को ध्यान से स्वाइप करते हुए। आप स्वाब स्वैब का टीका लगा सकते हैं। ऐसा करने के लिए, टैम्पोन को सबौराड के तरल माध्यम के 10 मिलीलीटर या कांच के मोतियों के साथ तरल पौधा में रखा जाता है और 10 मिनट के लिए पायसीकारी किया जाता है, 0.1 मिलीलीटर स्वाब वाशआउट को एक लॉन (लेशचेंको वी.एम., 1973 के अनुसार), या तीन बिंदुओं पर टीका लगाया जाता है।

त्वचा और नाखून के तराजू को पोषक माध्यम की सतह पर रखा जाता है, ध्यान से उन्हें दबाया जाता है।

मस्तिष्कमेरु द्रव (5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूगेट) के अवक्षेप को माध्यम के दो कप, प्रत्येक में 0.1 मिली में टीका लगाया जाता है, और इसके अवशेषों को संवर्धन माध्यम (तरल सबौराउड माध्यम या तरल पौधा) में डाला जाता है, जिसे टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है। 5 मिली की मात्रा। इनोक्युलेटेड कपों को हमेशा की तरह इनक्यूबेट किया जाता है, और संवर्धन माध्यम पर इनोक्यूलेशन वाली टेस्ट ट्यूबों को 10 दिनों के लिए +28 सी पर इनक्यूबेट किया जाता है।

सॉलिड मीडिया पर माइसेलियल फंगस की वृद्धि के मामले में, इसकी संस्कृति इस इनोक्यूलेशन से निर्धारित होती है, सबौराड अगर या वोर्ट अगर पर वृद्धि के अभाव में, फंगस का अध्ययन संवर्धन माध्यम से किया जाता है। ऐसा करने के लिए, कवक की संस्कृति को Czapek के अंतर घने माध्यम पर फिर से उपसंस्कृत किया जाता है और आगे पहचाना जाता है।

अंग ऊतक (बायोप्सी, शव परीक्षा) के एक टुकड़े से, तीन बिंदुओं पर अध्ययन के तहत टुकड़े के कटे हुए पक्ष के साथ घने माध्यम की सतह पर एक छाप बनाई जाती है। इसी समय, ऊतक के टुकड़ों को 50 मिलीलीटर तरल पोषक माध्यम (सबुरो, पौधा) में रखा जाता है।

दो से तीन पुनरावृत्तियों में संदिग्ध कवकनाशी के लिए रक्त की जांच की जाती है। 2% ग्लूकोज के साथ Sabouraud के तरल माध्यम के 50 या 100 मिलीलीटर में क्रमशः 5 या 10 मिलीलीटर रक्त का टीका लगाएं। फसलें 10 दिनों के लिए +37 C और +28 C पर उगाई जाती हैं। फसलों का पहला दर्शन 5 दिनों के बाद किया जाता है, दूसरा - 10 दिनों के बाद। पांचवें दिन, कोई नीचे की ओर महसूस की गई गांठ और एक सतह फिल्म के रूप में मायसेलियल कवक के विकास का निरीक्षण कर सकता है। कवक के जीनस और प्रजातियों को निर्धारित करने के लिए मायसेलियम को Czapek के विभेदक माध्यम पर फिर से लगाया जाता है। यदि 5वें दिन फंगस की कोई वृद्धि नहीं होती है, तो फसलों को 10 दिनों तक रखा जाता है और, वृद्धि के अभाव में, अध्ययन के परिणाम नकारात्मक के रूप में दर्ज किए जाते हैं।

तीन बिंदुओं पर बुवाई करते समय, दो और तीन बिंदुओं पर कवक के विकास को नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्ण, एक बिंदु पर - यादृच्छिक के रूप में निर्धारित किया जाता है। यदि आवश्यक हो, तो पुन: बोना संभव है।

मोल्ड कवक की पृथक संस्कृतियों की पहचान

संस्कृति के अलगाव के बाद, फिलामेंटस कवक को सामान्य के लिए Czapek के विभेदक माध्यम पर उपसंस्कृत किया जाता है और, यदि संभव हो तो, प्रजातियों की पहचान।

नैदानिक ​​​​प्रयोगशालाओं के अभ्यास में, एक नियम के रूप में, सांस्कृतिक और रूपात्मक पहचान मानदंड का उपयोग किया जाता है: अगर मीडिया (सांस्कृतिक निदान, मैक्रोमोर्फोलॉजी) पर कवक संस्कृति की वृद्धि की प्रकृति और कवक की सूक्ष्म आकृति विज्ञान का मूल्यांकन किया जाता है।

मुश्किल मामलों में, अतिरिक्त नैदानिक ​​​​विधियों का उपयोग किया जाता है (एंजाइमी गतिविधि का अध्ययन, कुछ मोल्ड कवक के विकास की तापमान विशेषताओं)।

मैक्रोमोर्फोलॉजी (सांस्कृतिक लक्षण) की अवधारणा में कॉलोनी की संरचना (शराबी, महसूस, मख़मली, कोबवेबेड, ऊनी, रैग्ड, फारेनसियस, आदि), सतह (सपाट, मुड़ा हुआ, ऊबड़, गुंबद के आकार का, कोरमीफॉर्म, आंचलिक, आदि) शामिल हैं। ।), कवक कॉलोनी और सब्सट्रेट (हरे, नीले, बैंगनी, काले, ग्रे, आदि के विभिन्न रंगों) का रंजकता, कॉलोनी की सतह पर एक्सयूडेट की उपस्थिति।

संस्कृति से कवक की सूक्ष्म आकृति विज्ञान का अध्ययन तैयारियों के अनुसार किया जाता है, जो कवक की सामान्य संबद्धता के आधार पर निम्नानुसार तैयार किया जाता है: तैयारी तैयार करने के लिए तरल की एक बूंद (शराब, ग्लिसरीन और पानी के बराबर भागों) को लागू किया जाता है एक गिलास स्लाइड; इसमें माइसेलियम का एक टुकड़ा रखा जाता है, कॉलोनी से एक माइकोलॉजिकल स्पैटुला के साथ एक त्रिकोण के रूप में काट दिया जाता है, जिसमें केंद्रीय और परिधीय भागों पर कब्जा होता है, कटे हुए टुकड़े को दो विदारक सुइयों के साथ सीधा किया जाता है ताकि गठन से बचा जा सके हवा के बुलबुले। कुछ मामलों में (मुकोर और राइजोपस), तैयारी तैयार करते समय, मायसेलियम को एक सूखी कांच की स्लाइड पर फैलाया जाता है, उस पर तरल की एक बूंद लगाई जाती है और एक कवरस्लिप के साथ कवर किया जाता है। तैयारियों को निम्न और उच्च आवर्धन पर सूक्ष्मदर्शी के नीचे देखा जाता है। वे सब्सट्रेट और एरियल मायसेलियम का अध्ययन करते हैं, सेप्टा (विभाजन) की उपस्थिति या अनुपस्थिति पर ध्यान देते हैं, स्पोरुलेशन की प्रकृति पर ध्यान देते हैं: कोनिडिया के साथ कॉनिडियोफोर्स और स्पोरैंगियोस्पोर के साथ स्पोरैंगिया।

Conidiophores उनकी संरचना में भिन्न होते हैं: साधारण एकल बीजाणु-असर वाले हाइपहे से शाखाओं वाले पेड़ जैसी संरचनाओं तक। Conidiophores अकेले या समूहों में स्थित होते हैं, वे माइसेलियम के वानस्पतिक हाइप से स्पष्ट रूप से भिन्न होते हैं, रंगहीन या रंगीन, आरोही, सीधा, अवरोही, रेंगना। इनमें एक कोशिका और विभिन्न आकृतियों और आकारों की बड़ी संख्या में कोशिकाएँ हो सकती हैं, जिनमें से प्रत्येक का अपना नाम होता है। उदाहरण के लिए, जीनस एस्परगिलस में, कोनिडियोफोर में निम्नलिखित कोशिकाएं होती हैं: डंठल, वेसिकुलर सूजन, स्टेरिग्माटा, कोनिडिया की श्रृंखला। जीनस पेनिसिलियम में, कोनिडियोफोर में सरल या जटिल ब्रश का रूप होता है, जिसमें विभिन्न कोशिकाएं भी होती हैं: रमी टहनियाँ, मेटुले, फियालाइड्स, कोनिडिया की चेन।

म्यूकोर और राइजोपस में एंडोस्पोरैन्जियोस्पोर्स के साथ स्पोरैंगिया के रूप में स्पोरुलेशन होता है। स्पोरैंगियम स्पोरैंगियोफोर के अंत में है। स्पोरैंगिया गोलाकार या नाशपाती के आकार के होते हैं, जिनमें से अधिकांश में एक विशेष स्तंभ होता है, जो स्पोरैंगियम के अंदर स्पोरैंगियोफोर की निरंतरता है। Sporangiospores गोल, रंगहीन या रंगीन होते हैं।

सांचों में कोनिडिया (बीजाणु) बहुरूपी (बेलनाकार, गोलाकार, अंडाकार, दीर्घवृत्ताकार, अंडाकार, नाशपाती के आकार का, क्लब के आकार का), एककोशिकीय और बहुकोशिकीय होते हैं, आकार और रंग में भिन्न होते हैं, एकान्त, जंजीरों में या सिर में एकत्र होते हैं और समूहों में व्यवस्थित होते हैं . कोनिडिया की सतह चिकनी, खुरदरी, काँटेदार, मस्सादार, ब्रिसल आदि हो सकती है।

सूक्ष्म परीक्षण और डिमॉर्फिक कवक के कारण मायकोसेस में रोग संबंधी सामग्री की बुवाई

इन मायकोसेस के साथ, रोगजनकों के द्विरूपता को ध्यान में रखना आवश्यक है।

प्राथमिक रोगजनक माइकोटिक संक्रमणों में पैथोलॉजिकल सामग्री (कोक्सीडायोडोसिस, हिस्टोप्लास्मोसिस, पैराकोकिडियोइडोमाइकोसिस, उत्तरी अमेरिकी ब्लास्टोमाइकोसिस), साथ ही क्रोमोमाइकोसिस, स्पोरोट्रीकोसिस, और मायसेटोमास मवाद, थूक, त्वचा और श्लेष्म झिल्ली पर अल्सरेटिव घावों से स्क्रैपिंग, मस्तिष्कमेरु द्रव, रक्त हो सकता है। foci हार से बायोप्सी किए गए टुकड़े।

इन मायकोसेस के प्रेरक एजेंटों को निर्धारित करने में कठिनाई इस तथ्य में निहित है कि, उनके द्विरूपता के कारण, रोग संबंधी सामग्री की माइक्रोस्कोपी कवक के ऊतक रूपों को प्रकट करेगी, अक्सर एंडोस्पोर के साथ विभिन्न आकारिकी या गोलाकारों के खमीर कोशिकाएं, पूरी तरह से अलग होती हैं। एक ही कवक के तत्व, इसकी संस्कृति से निकाले गए +28 - +30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर सामान्य सबौराड एगेव पर, अम्लीय के करीब पीएच मान के साथ उगाए जाते हैं। हालांकि, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि कुछ डिमॉर्फिक कवक में, संस्कृति में कवक के खमीर विकास चरण को प्राप्त करना संभव है, जो अक्सर इसके ऊतक रूप जैसा दिखता है, लेकिन जब कमजोर क्षारीय प्रतिक्रिया (पीएच) के साथ प्रोटीन में समृद्ध मीडिया पर उगाया जाता है। = 7.6 - 7.8 ), 37 o C के तापमान पर।

उपरोक्त मशरूम पर लागू होता है: हिस्टोप्लाज्मा कैप्सुलटम, ब्लास्टोमाइसेस डर्माटिटिडिस, पैराकोकिडायोइड्स ब्रासिलिएन्सिस, कोकिडायोइड्स इमिटिसऔर स्पोरोथ्रिक्स शेन्की।

यहां उल्लिखित कवक के कारण होने वाले माइकोस का प्रयोगशाला निदान माइक्रोस्कोपी के दौरान रोग संबंधी सामग्री में ऊतक रूपों का पता लगाने, रोगज़नक़ की संस्कृति के अलगाव और सांस्कृतिक और रूपात्मक विशेषताओं द्वारा इसकी पहचान पर आधारित है।

10% कास्टिक क्षार घोल या अल्कोहल और ग्लिसरीन के मिश्रण की बराबर मात्रा में या दाग वाले स्मीयर (तालिका 3) में कांच की स्लाइड पर बिना दाग वाली तैयारी में सूक्ष्म परीक्षण किया जाता है।

पेट्री डिश में उपरोक्त पोषक माध्यम पर पैथोलॉजिकल सामग्री का टीकाकरण आम तौर पर स्वीकृत विधि के अनुसार एक बैक्टीरियोलॉजिकल स्पैटुला का उपयोग करके किया जाता है।

2.5. डर्माटोमाइकोसिस (केराटोमाइकोसिस और डर्माटोफाइटिस) में रोग संबंधी सामग्री की सूक्ष्म जांच और बुवाई।

अध्ययन का उद्देश्य सतही मायकोसेस हैं जो केवल एपिडर्मिस की केराटिन परत को प्रभावित करते हैं, और डर्माटोफाइट्स जो त्वचा और उसके उपांगों (बाल, नाखून) को प्रभावित करते हैं, जिसके प्रेरक एजेंट जेनेरा से संबंधित कवक हैं। ट्राइकोफाइटन, माइक्रोस्पोरम और एपिडर्मोफाइटन।

प्रयोगशाला माइकोलॉजिकल परीक्षा में अन्य मायकोसेस के समान चरण शामिल हैं: सामग्री की माइक्रोस्कोपी और जब इसे बोया जाता है तो शुद्ध संस्कृति प्राप्त करना। सामग्री का उचित संग्रह माइक्रोस्कोपी और संस्कृति की सफलता को बहुत प्रभावित करता है।

पैथोलॉजिकल सामग्री लेने के बाद जितनी जल्दी हो सके जांच की जाती है। पहले, इसे तीन भागों में बांटा गया है: माइक्रोस्कोपी, खेती और पुन: परीक्षा के लिए। ऊतकों में कवक की उपस्थिति को स्थापित करने के लिए रोग संबंधी सामग्री की माइक्रोस्कोपी सबसे सरल और तेज़ तरीका है। कुचल सामग्री को 10-20% KOH घोल की एक बूंद में कांच की स्लाइड के बीच में रखा जाता है और एक अल्कोहल लैंप की लौ पर थोड़ा गर्म किया जाता है जब तक कि बूंद के किनारे के साथ एक सफेद रिम प्राप्त नहीं हो जाता है, जिसे कवर स्लिप से ढक दिया जाता है। और 5-10 मिनट (बालों, त्वचा के तराजू) और 30-40 मिनट (नाखून) के लिए धब्बेदार और ज्ञानवर्धन के लिए छोड़ दिया; सामग्री को बिना गर्म किए संसाधित किया जा सकता है, इसके लिए तैयारी को 20% KOH समाधान में 30-60 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है।

सूक्ष्मदर्शी रूप से पहले एक छोटे के नीचे, फिर सूक्ष्मदर्शी में बड़ी वृद्धि।

रोगज़नक़ के अलगाव और पहचान के लिए सांस्कृतिक परीक्षा आवश्यक है। टीका सामग्री को जितना हो सके कुचल दिया जाता है और 1-2 सेमी की दूरी पर परखनली में तिरछी अगर पर कम से कम मात्रा में 2-3 बिंदुओं पर टीका लगाया जाता है। कम से कम 2-3 टेस्ट ट्यूब (बाल) और 4-5 टेस्ट ट्यूब (त्वचा और नाखून तराजू) एक नमूने की सामग्री के साथ टीका लगाया जाता है। डर्माटोफाइट्स के प्राथमिक अलगाव के लिए, 2-4% ग्लूकोज या एंटीबैक्टीरियल एंटीबायोटिक्स (पेनिसिलिन 50 माइक्रोग्राम / एमएल + स्ट्रेप्टोमाइसिन 50 माइक्रोग्राम / एमएल या बायोमाइसिन 200 यूनिट / एमएल) युक्त मानक सबौराड अगर माध्यम का उपयोग करना सबसे अच्छा है। -मोल्ड एंटीबायोटिक एक्टिडियन ( साइक्लोहेमेसाइड) 0.1 - 0.5 मिलीग्राम / एमएल। Actidion डर्माटोफाइट्स के विकास को प्रभावित नहीं करता है और कई मोल्ड्स, साथ ही कैंडिडा और क्रिप्टोकोकस प्रजातियों को रोकता है।

टीकाकरण 22-30 डिग्री सेल्सियस (अधिमानतः 28 डिग्री सेल्सियस) पर ऊष्मायन किया जाता है। शुरू की गई सामग्री के किनारों के साथ बुवाई बिंदुओं पर ऊष्मायन के 4 से 12 दिनों तक डर्माटोफाइट वृद्धि की उपस्थिति देखी जाती है। यदि 30 दिनों के भीतर कोई वृद्धि नहीं होती है, तो संस्कृति के परिणाम नकारात्मक माने जाते हैं। इष्टतम परिस्थितियों में, कई डर्माटोफाइट्स की प्राथमिक संस्कृतियों को टीकाकरण के 7-10 दिनों के बाद पहचाना जा सकता है, लेकिन संस्कृतियों की निगरानी 20-30 दिनों तक की जानी चाहिए। प्राथमिक संस्कृतियां अपेक्षाकृत धीमी गति से बढ़ती हैं, और जब एंटीबायोटिक दवाओं के बिना मीडिया का उपयोग किया जाता है, तो डर्माटोफाइट्स तेजी से बढ़ते बैक्टीरिया या मोल्ड से अभिभूत हो सकते हैं। जब प्राथमिक टीकाकरण में वृद्धि दिखाई देती है, तो एक शुद्ध संस्कृति प्राप्त करने के लिए कॉलोनी के किनारे से एक नए अंतर माध्यम में स्क्रीन करना आवश्यक है, जो पृथक डर्माटोफाइट की पहचान के लिए एक सामग्री के रूप में काम करेगा।

2.6. मायकोसेस के निदान के लिए सीरोलॉजिकल तरीके

सीरोलॉजिकल विधियों के मूल्य में मुख्य रूप से निम्नलिखित शामिल हैं: संभावित आक्रामक मायकोसेस वाले रोगियों की पहचान; एलर्जी रोगों की माइकोटिक प्रकृति की पुष्टि; माइकोसेस के विकास के लिए जोखिम समूहों की स्क्रीनिंग परीक्षा।

माइकोकैरिज के साथ सीरोलॉजिकल परीक्षणों के गलत सकारात्मक परिणाम संभव हैं और फंगल एंटीजन के प्रति संवेदनशील स्वस्थ लोगों में, नकारात्मक परीक्षण चल रहे आक्रामक माइकोसिस की पृष्ठभूमि के खिलाफ भी इम्यूनोडेफिशियेंसी के साथ हो सकते हैं।

माइकोसिस के सीरोलॉजिकल निदान के लिए नियमित पारंपरिक तरीके
पर्याप्त विवरण में वर्णित /P.N.Kashkin, V.V.Lisin। "व्यावहारिक
गाइड टू मेडिकल माइकोलॉजी", मेडिसिन, 1983 /। हालाँकि, हाल ही में
दशकों, पद्धतिगत दृष्टिकोणों में ध्यान देने योग्य बदलाव हुए हैं / एलिनोव एन.पी.,
2001/. एंटीजन और एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए प्रस्तावित मूल प्रक्रियाएं
कवक कोशिकाओं के कुछ चयापचयों; विशेष निदान बनाया
किट ("व्हेल"), उदाहरण के लिए Pastorex® Candida, में निर्धारण के लिए
एंटीजेनिक के बार-बार ऑलिगोमैनोज एपिटोप्स के "लेटेक्स-एग्लूटीनेशन" की प्रतिक्रियाएं
बड़ी संख्या में मैक्रोमोलेक्यूल्स पर संरचनाएं / व्यक्त की जाती हैं
कवक; कैंडिडा मन्नान प्रतिजन के निर्धारण के लिए, उदाहरण के लिए, में
कैंडिडामिया के रोगी के सीरम, प्लेटेलिया® कैंडिडा किट का उपयोग किया जा सकता है।
पहले सेट का उपयोग करते हुए, एंटीजेनिक संरचनाओं के निर्धारण के लिए थ्रेशोल्ड 2.5 एनजी / एमएल है, दूसरे का उपयोग करते हुए, _________ विधि के संयोजन के साथ, निर्धारित करने के लिए दहलीज - 0.5 एनजी / एमएल।

मायकोसेस के प्रेरक एजेंट, जो अक्सर विभिन्न नैदानिक ​​सामग्रियों के प्रयोगशाला अध्ययन में पाए जाते हैं

खून

• कैंडीडा
• क्रिप्टोकोकस
• रक्त परीक्षण में मायसेलियल रोगजनकों का शायद ही कभी पता लगाया जाता है, इसके अपवाद के साथ फुसैरियम

मस्तिष्कमेरु द्रव

• कैंडीडा
• क्रिप्टोकोकस

फोड़े, अल्सर आदि से मवाद निकलना।

• कैंडीडा
• क्रिप्टोकोकस
• फुसैरियम
• एस्परजिलस
• स्पोरोट्रिक्स

श्वसन स्राव (थूक, बाल, ब्रोन्कियल ब्रश बायोप्सी, ट्रांसट्रैचियल एस्पिरेट)

• एस्परजिलस
• कैंडीडा
• क्रिप्टोकोकस
• म्यूकर
• स्केडोस्पोरियम
• राइजोपस
• स्पोरोट्रिक्स

घावों से वियोज्य, बायोप्सी सामग्री

• एस्परजिलस
• कैंडीडा
• फुसैरियम
• राइजोपस

अन्य बायोसब्सट्रेट

• कैंडीडा
• क्रिप्टोकोकस

छाती, उदर गुहा से सामग्री; श्लेष द्रव

• एस्परजिलस
• कैंडीडा
• फुसैरियम

नेत्रकाचाभ द्रव

• कैंडीडा
• एस्परजिलस

चतुर्थ। प्रणालीगत मायकोसेस के निदान के लिए मानदंड: अंतिम निदान के नैदानिक ​​और प्रयोगशाला पैरामीटर

ग्रासनलीशोथ

• एसोफैगोस्कोपी में विशिष्ट परिवर्तनों की उपस्थिति
• बायोप्सी सामग्री की खेती के दौरान कवक का पता लगाना
• दाग वाले स्मीयरों में स्यूडोमाइसीलियम की उपस्थिति या बायोप्सी सामग्री में आक्रामक कवक वृद्धि के लक्षण

न्यूमोनिया

निमोनिया के कारण कैंडिडा एसपीपी।

• फेफड़ों के रेडियोग्राफ पर तीव्र घुसपैठ परिवर्तन, के साथ मेल खाता है नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँकवक निमोनिया
• खोज कैंडिडा एसपीपी।जब ट्रान्सथोरेसिक बायोप्सी, ट्रांसब्रोन्चियल बायोप्सी, फेफड़े की बायोप्सी निष्कर्ष, या थोरोस्कोपिक गाइडेड बायोप्सी से प्राप्त निचले श्वसन अपशिष्ट से सामग्री की खेती करते हैं
• पर्याप्त रूप से सना हुआ बायोप्सी सामग्री में स्यूडोमाइसेलियम का पता लगाना

निमोनिया के कारण एस्परगिलस एसपीपी।, फुसैरियम एसपीपी।, स्केडोस्पोरियम एपिओस्पर्मम

• ऊतकों और सकारात्मक संस्कृति में कवक तत्वों का पता लगाना
• लगातार या प्रगतिशील फेफड़े एंटीबायोटिक चिकित्सा के लिए प्रतिरोधी घुसपैठ करते हैं
• थूक या बाल की खेती के दौरान संकेतित रोगजनकों में से एक का पता लगाना
• निमोनिया के नैदानिक ​​लक्षण (खांसी, सांस की तकलीफ, "फुफ्फुस" दर्द, घरघराहट, फुफ्फुस रगड़)
• फेफड़ों के एक्स-रे या सीटी पर विशिष्ट परिवर्तन:

सबप्लुरल घुसपैठ, गांठदार, एक्यूट-एंगल या कैवर्नस परिवर्तन

फेफड़े की सीटी पर प्रभामंडल का चिन्ह

गुहाओं के गठन और "दरांती" लक्षण की उपस्थिति के साथ घुसपैठ परिवर्तन की प्रगति

• BAL की खेती के दौरान अन्य रोगजनकों की अनुपस्थिति, जो फेफड़ों में प्रस्तुत परिवर्तन का कारण बन सकती है

साइनसाइटिस

• तीव्र साइनसिसिस की नैदानिक ​​​​और रेडियोग्राफिक विशेषताएं
• महाप्राण या बायोप्सी सामग्री के अध्ययन में माइकोसिस के सूक्ष्म और सांस्कृतिक लक्षण

मूत्र पथ के संक्रमण

• > 1 x 10 सीएफयू/एमएल सही ढंग से एकत्रित मूत्र की बार-बार संस्कृतियों पर पता चला है

कवकनाशी

• शरीर के तापमान में वृद्धि के दौरान रक्त संस्कृति के दौरान कवक का एकल पता लगाना> 38 ° C

तीव्र प्रसार माइकोसिस

• गहरे ऊतक क्षति (चमड़े के नीचे के ऊतक सहित) के सांस्कृतिक या ऊतकीय संकेतों के संयोजन में कवकनाशी या दो सामान्य रूप से बाँझ बायोसब्सट्रेट से रोगज़नक़ की पहचान

एंडोफथालमिटिस

• एंडोफथालमिटिस के नेत्र संबंधी लक्षण
• आंख, रक्त या प्रसार के अन्य केंद्रों से रोगज़नक़ की पहचान

फोड़ा या अस्थिमज्जा का प्रदाह

• अस्थिमज्जा का प्रदाह के रेडियोग्राफिक/सीटी/एमआरआई लक्षण
• महाप्राण या बायोप्सी सामग्री में रोगज़नक़ की पहचान

मस्तिष्कावरण शोथ

• CSF परिवर्तनों का निर्धारण, सूजन की उपस्थिति की पुष्टि करना, और CSF की माइक्रोस्कोपी द्वारा कवक का पता लगाना
• CSF कल्चर या एंटीजन डिटेक्शन द्वारा कवक का पता लगाना Cr.neoformans, Candida और Aspergillusसीएसएफ में

जीर्ण प्रसार (हेपेटोलियनल) कैंडिडिआसिस

संभव

• के साथ संयोजन में न्यूट्रोपेनिया की अवधि के अंत के बाद लगातार या रुक-रुक कर बुखार विशेषणिक विशेषताएंजिगर, प्लीहा, या गुर्दे को नुकसान

सिद्ध किया हुआ

• बीजारोपण के साथ ऊपर संयुक्त कैंडिडा एसपीपी।जिगर, प्लीहा या गुर्दे को नुकसान के संकेतों की उपस्थिति से पहले रक्त से, या foci से बायोप्सी सामग्री में कैंडिडिआसिस के सांस्कृतिक, ऊतकीय संकेतों के साथ

V. फंगल संक्रमण के कारण

फंगल संक्रमण और उनके रोगजनकों को वर्गीकृत करने के लिए विभिन्न सिद्धांत हैं। यह हमें रोगजनक कवक को 5 मुख्य समूहों में विभाजित करने के लिए व्यावहारिक रूप से सबसे सरल और सबसे समीचीन लगता है:

1. सतही मायकोसेस के रोगजनक;

2. जिल्द की सूजन के प्रेरक एजेंट;

3. चमड़े के नीचे के मायकोसेस के रोगजनकों;

4. गहरे मायकोसेस (प्राथमिक रोगजनक माइक्रोमाइसेट्स, अवसरवादी संक्रमण के रोगजनकों) के प्रेरक एजेंट।

5. स्यूडोमाइकोसेस के प्रेरक कारक।

* इस बात पर जोर दिया जाना चाहिए कि इम्यूनोसप्रेस्ड रोगियों में पहले तीन समूहों के रोगजनक कवक और कई अंग घावों का कारण बन सकते हैं।

निम्नलिखित खंडों में, हम एक ही योजना के अनुसार मायकोसेस के प्रेरक एजेंटों का विवरण देते हैं: स्वीकृत नामकरण के अनुसार इसका नाम, समानार्थक शब्द की सूची, पोषक मीडिया पर उपनिवेशों का एक मैक्रोस्कोपिक विवरण और कवक तत्वों का सूक्ष्म विवरण। देशी तैयारियों में और उपनिवेशों से सूक्ष्मदर्शी के नीचे दिखाई देता है। प्रकृति में कवक के वितरण पर डेटा भी दिया गया है और उनके कारण होने वाली बीमारियों को सूचीबद्ध किया गया है।

त्वचा के कवक रोगों की नैदानिक ​​तस्वीर बहुत बहुरूपी है, इसलिए, सभी मामलों में, प्रयोगशाला अनुसंधान विधियों द्वारा निदान की पुष्टि की जानी चाहिए। माइकोसेस के प्रयोगशाला निदान के लिए, सूक्ष्म, ल्यूमिनसेंट, सांस्कृतिक, प्रतिरक्षाविज्ञानी (एलर्जी और सीरोलॉजिकल) अनुसंधान विधियों, साथ ही साथ पशु प्रयोगों का उपयोग किया जाता है।

माइकोसिस के प्रयोगशाला निदान में कई चरण होते हैं। सामान्य नैदानिक ​​अभ्यास में, वे आमतौर पर संक्रमित सामग्री की सूक्ष्म और सांस्कृतिक जांच तक सीमित होते हैं। यदि आवश्यक हो, तो इन विधियों को प्रतिरक्षाविज्ञानी द्वारा पूरक किया जाता है, ऊतकीय अध्ययन, प्रायोगिक पशुओं का संक्रमण। कुछ त्वचा मायकोसेस में, निदान में ल्यूमिनसेंट विधि एक महत्वपूर्ण सहायक भूमिका निभाती है।

पैथोलॉजिकल सामग्री लेना।

माइकोसेस के प्रयोगशाला अध्ययन की सफलता काफी हद तक रोग संबंधी सामग्री के सही संग्रह पर निर्भर करती है। चूंकि कवक विभिन्न मानव अंगों को संक्रमित करने में सक्षम हैं, यदि माइकोसिस का संदेह है, तो विभिन्न रोग संबंधी सामग्रियों की जांच करना आवश्यक है। त्वचाविज्ञान अभ्यास में, अक्सर आपको मायकोसेस से निपटना पड़ता है, जिसमें त्वचा के तराजू, बाल और नाखून कवक के लिए जांच के अधीन होते हैं। यदि गहरे और प्रणालीगत मायकोसेस का संदेह है, तो थूक, धुलाई, मूत्र, मल, मवाद, श्लेष्मा झिल्ली के स्राव, रक्त, अंगों के टुकड़े और बायोप्सीड ऊतक के कवक के लिए प्रयोगशाला निदान करना आवश्यक हो सकता है।

त्वचा पर घावों में, जिसमें से रोग संबंधी सामग्री लेनी होती है, कुछ दिनों या हफ्तों में सभी उपचार बंद कर देना आवश्यक है। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि कमजोर कीटाणुनाशक या यहां तक ​​कि उदासीन एजेंटों के उपयोग से अध्ययन में बाधा आ सकती है। रोग संबंधी सामग्री के संग्रह से तुरंत पहले, घाव का इलाज 96% अल्कोहल या xylene समाधान के साथ किया जाना चाहिए। सामग्री को ताजा, लेकिन पहले से ही पूरी तरह से विकसित घावों से लिया जाता है। त्वचा के तराजू को फॉसी की परिधि से हटा दिया जाना चाहिए, कवक अक्सर यहां मायसेलियम और बीजाणुओं के रूप में पाए जाते हैं। त्वचा के तराजू को एक स्केलपेल, क्रस्ट - एपिलेशन चिमटी के साथ हटा दिया जाता है।

खोपड़ी के माइकोसिस वाले रोगियों में, प्रभावित बालों को एपिलेशन चिमटी से हटा दिया जाता है। अनुसंधान के लिए, एक चाप या अल्पविराम के रूप में छोटा, मुड़, घुमावदार, साथ ही लंबे समय तक लेना आवश्यक है, लेकिन आधार, बालों पर एक म्यान के साथ कवर किया गया है। यदि आपको फेवस पर संदेह है, तो आपको याद रखना चाहिए कि बाल टूटते नहीं हैं, बल्कि सुस्त, बेजान, भूरे हो जाते हैं।

प्रभावित नाखून प्लेटों के सतही फॉसी से स्क्रैपिंग एक स्केलपेल के साथ बनाई जाती है, मोटी नाखून प्लेटों को स्केलपेल या नाखून कतरनी से काट दिया जाता है।

तरल रोग संबंधी सामग्री को बाँझ व्यंजन, त्वचा के गुच्छे, नाखून और बालों में - सादे या नरम चर्मपत्र कागज की चादरों पर एकत्र किया जाता है।

टीकाकरण के लिए श्लेष्मा झिल्ली से वियोज्य को शोषक कपास के एक स्वाब के साथ लिया जाता है, जिसे बाद में 2 मिलीलीटर पोषक माध्यम (साबुरो के पौधा) के साथ एक सूखी बाँझ टेस्ट ट्यूब या टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। योनि से सामग्री पश्च फोर्निक्स से प्राप्त की जाती है; लिंग के सिर से - कोरोनल सल्कस के क्षेत्र से।

बाहरी श्रवण नहर से सामग्री को एक लूप या स्वैब के साथ लिया जाता है, जिसे एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है।

प्रयोगशाला द्वारा प्राप्त सामग्री को कमरे के तापमान पर संग्रहीत करने के 1 घंटे के भीतर या 4 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत करने पर 3 घंटे से अधिक समय तक जांच की जाती है।

कवक पर शोध के लिए रक्त को क्यूबिटल नस से 5-10 मिलीलीटर की मात्रा में लिया जाता है और तुरंत एक तरल पोषक माध्यम या सोडियम साइट्रेट की समान मात्रा के साथ फ्लास्क में जोड़ा जाता है।

यदि कवक के लिए बायोप्सी सामग्री का अध्ययन करना आवश्यक है, तो इसे एक बाँझ पेट्री डिश में रखा जाता है और माइक्रोस्कोपी, पोषक मीडिया पर टीकाकरण और ऊतकीय तैयारी की तैयारी के लिए उपयोग किया जाता है।

सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षण।

कवक के लिए रोग संबंधी सामग्री की सूक्ष्म जांच देशी और दागदार तैयारियों में की जाती है। बिना दाग वाली तैयारी तैयार करने के लिए, परिणामी सामग्री को स्केलपेल या विदारक सुई से कुचल दिया जाता है और कांच की स्लाइड के बीच में रखा जाता है। कवक के तत्वों को अधिक स्पष्ट रूप से पहचानने के लिए, सामग्री को स्पष्ट किया जाता है (मैकरेटेड)। इस प्रयोजन के लिए, वे विभिन्न पदार्थों की मदद का सहारा लेते हैं, सबसे अधिक बार कास्टिक क्षार (KOH, NaOH), जो एपिडर्मल तराजू, बलगम, मवाद को घोलते हैं, बालों के रंगद्रव्य को स्पष्ट करते हैं और इस तरह कवक को अनुसंधान के लिए उपलब्ध कराते हैं।

कुछ प्रयोगशालाओं में, सूक्ष्म परीक्षण की तैयारी का स्पष्टीकरण 15 - 30% केओएच समाधान के साथ किया जाता है, जिसमें पार्कर की वाणिज्यिक गहरे नीले रंग की स्याही (पार्कर का सुपरक्रोम ब्लू-ब्लैकइंक) का 5-10% जोड़ा जाता है। इस रंग के साथ, हाइपहे और बीजाणु नीले रंग के होते हैं।