Skrīninga tests HIV infekcijas diagnostikā. HIV infekcijas diagnostika Standarta HIV diagnosticēšanas metode ir

/ 16
Sliktākais Labākais

HIV infekcijas pārbaudei tiek pakļauti:

2. Personas ar aizdomām vai apstiprinātu diagnozi: bakteriāla infekcija bērniem līdz 13 gadu vecumam, daudzkārtēja un recidivējoša; barības vada, trahejas, bronhu vai plaušu kandidoze; invazīvs dzemdes kakla vēzis; izplatīta vai ekstrapulmonāra kokcidioidomikoze; ekstrapulmonāla kriptokokoze; kriptosporidioze ar caureju 1 mēnesi vai ilgāk; citomegalovīrusa bojājumi citos orgānos, izņemot aknas, liesu, limfmezglus pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi; citomegalovīrusa retinīts ar redzes zudumu; herpetiska infekcija, kas izraisa multifokālas čūlas, kas nedzīst 1 mēneša laikā, vai bronhīts, pneimonija, ezofagīts; diseminēta vai ekstrapulmonāla histoplazmoze; izosporoze ar caureju ilgāk par 1 mēnesi; plaši izplatīta vai ārpusplaušu tuberkuloze; plaušu tuberkuloze pieaugušajiem vai pusaudžiem, kas vecāki par 13 gadiem; ārpusplaušu tuberkuloze; citas mikobaktēriju izraisītas slimības, izņemot M. tuberculosis diseminēto vai ekstrapulmonālo; pneimonija, ko izraisa pneimocistis; progresējoša multifokāla leikoencefalopātija; salmonellas (izņemot Salmonella typhi) septicēmija, recidivējoša; smadzeņu toksoilāze bērniem, kas vecāki par 1 mēnesi; Kapoši sarkomas; limfoīdā intersticiālā pneimonija bērniem līdz 13 gadu vecumam; Burkitta limfoma; imūnblastiskā limfoma; primārā smadzeņu limfoma; novājēšanas sindroms, B hepatīts, HBsAg pārnēsāšana; infekciozā mononukleoze; recidivējoša herpes zoster personām, kas vecākas par 60 gadiem; seksuāli transmisīvās slimības.

Augsti specializētā laboratorijā tiek veiktas:

a) asinīs cirkulējošo antivielu, antigēnu un imūnkompleksu noteikšana; vīrusa kultivēšana, tā genoma materiāla un fermentu noteikšana;

b) šūnu saites funkciju novērtējums imūnsistēma. Galvenā loma ir seroloģiskās diagnostikas metodēm, kas vērstas uz antivielu, kā arī patogēnu antigēnu noteikšanu asinīs un citos ķermeņa bioloģiskajos šķidrumos.

Antivielu noteikšana pret HIV tiek veikta, lai:

a) asins pārliešanas un transplantācijas drošums;

b) uzraudzība, testēšana, lai uzraudzītu HIV infekcijas izplatību un pētītu tās izplatības dinamiku konkrētā populācijā;

c) HIV infekcijas diagnostika, t.i., brīvprātīga asins seruma pārbaude praktiski veseliem cilvēkiem vai pacientiem ar dažādām klīniskās pazīmes un simptomi, kas līdzīgi HIV infekcijai vai AIDS.

HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas sistēma balstās uz trīs posmu principu. Pirmais posms ir skrīnings, kas paredzēts, lai veiktu primārās asins analīzes, lai noteiktu antivielu klātbūtni pret HIV proteīniem. Otrais posms ir atsauces – tas ļauj ar speciālu metodisko paņēmienu palīdzību noskaidrot (apstiprināt) skrīninga posmā iegūto primāro pozitīvo rezultātu. Trešais posms - eksperts, paredzēts iepriekšējos laboratoriskās diagnostikas posmos konstatēto HIV infekcijas marķieru esamības un specifikas galīgai pārbaudei. Nepieciešamība pēc vairākiem laboratoriskās diagnostikas posmiem galvenokārt ir saistīta ar ekonomiskiem apsvērumiem.

Praksē tiek izmantoti vairāki testi, lai ar pietiekamu ticamības pakāpi identificētu ar HIV inficētus cilvēkus:

ELISA (ELISA) tests (ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests) pirmā līmeņa noteikšanai ir raksturīgs ar augstu jutību, lai gan ar mazāku specifiskumu nekā turpmāk minētajam;

Imūnblots (Western-blot), ļoti specifisks un visbiežāk izmantotais tests, lai atšķirtu HIV-1 un HIV-2;

Antigenēmijas p25 tests, efektīvs infekcijas sākuma stadijās;

Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR).

Asins paraugu masveida skrīninga gadījumos ieteicams pārbaudīt pētāmo personu grupas serumu maisījumus, kas sastādīti tā, lai katra parauga galīgais atšķaidījums nepārsniegtu 1:100. Ja seruma un strāvas maisījums ir pozitīvs, tiek pārbaudīts katrs pozitīvā maisījuma serums. Šī metode neizraisa jutības zudumu gan ELISA, gan imūnblotā, bet samazina darbaspēka izmaksas un sākotnējās izmeklēšanas izmaksas par 60-80%.

HIV infekcijas primārajā serodiagnozē kopējās antivielas nosaka, izmantojot skrīninga skrīninga testus – ELISA un aglutinācijas reakcijas. Otrajā (šķīrējtiesas) posmā tiek izmantots sarežģītāks tests - imūnblots, kas ļauj ne tikai apstiprināt vai noraidīt sākotnējo secinājumu, bet arī to izdarīt, nosakot antivielas pret atsevišķiem vīrusa proteīniem.

Saistīts imūnsorbcijas tests(ELISA) ir galvenā un visplašāk izmantotā metode HIV antivielu noteikšanai. Bet ELISA izmantošanas trūkumi HIV infekcijas serodiagnozē ietver biežus viltus pozitīvus rezultātus. Šajā sakarā ELISA rezultāts nav pamats, lai secinātu, ka subjekts ir HIV seropozitīvs. Tas ir saistīts ar nepietiekamu imūnsorbenta attīrīšanu no balasta proteīniem; seruma antivielu spontāna saistīšanās ar plastmasu, ja tās zonas, kuras neaizņem imūnsorbents, ir nepietiekami bloķētas vai nav bloķētas ar pilnīgi īpašu neitrālu proteīnu; krusteniskā mijiedarbība ar dažādu proteīnu imūnsorbenta HIV proteīniem, kas atrodas indivīdu asinīs ar noteiktiem, biežāk autoimūniem patoloģiskiem procesiem, piemēram, multiplā skleroze, SLE, tuberkuloze; ar biežu ziedošanu, infekcijas un onkoloģiskām slimībām, apdegumiem, grūtniecību, atkārtotu asins pārliešanu, orgānu, audu transplantāciju, kā arī personām, kurām tiek veikta hemodialīze; ar reimatoīdā faktora klātbūtni asinīs, bieži provocējot HIV viltus pozitīvas reakcijas; izmeklējamo cilvēku asinīs antivielu klātbūtne pret HIV gag proteīniem un, galvenais, pret proteīnu p24 (acīmredzot, antivielas veidojas pret eksogēniem vai endogēniem retrovīrusiem, kas vēl nav identificēti). Tā kā anti-p24 tiek sintezēts bez kļūmēm agrīnās stadijas Tiek veikta HIV serokonversija, turpmāka imunoloģiskā novērošana personām ar antivielām pret HIV gag proteīniem, kā arī to izņemšana no ziedošanas.

Enzīmu imūntesta jutīgums un specifika nepārtraukti pieaug. Rezultātā ceturtās paaudzes ELISA diagnostikas spēju ziņā nav zemāka par imūnblotēšanu, un to var izmantot ne tikai skrīningā, bet arī HIV infekcijas diagnostikas apstiprināšanas stadijā [Smolskaya T. T., 1997].

Imunoblotēšana ir pēdējā seroloģiskās diagnostikas metode, kas ļauj izdarīt galīgo secinājumu par pētāmās personas HIV pozitivitāti vai negatīvismu.

Pastāv skaidra korelācija starp serumu pētījuma rezultātiem imūnblotā un ELISA - divreiz pozitīvs ELISA ar dažādām testu sistēmām, serums 97-98% gadījumu pēc tam imūnblotā izrādās HIV pozitīvs. Ja serumi ELISA testā izrādījās pozitīvi tikai vienā no divām izmantotajām testa sistēmām, imūnblotā tie tiek atklāti pozitīvi tikai 4% gadījumu. 5% gadījumu, veicot apstiprinošus pētījumus cilvēkiem ar pozitīviem datiem, ELISA imūnblots var dot "nenoteiktus" rezultātus, un to vidū aptuveni 20% gadījumu antivielas pret HIV-1 gag proteīniem (p55, p25, p18 ). Antivielu klātbūtne tikai pret HIV-1 gag proteīniem ir iemesls papildu asins seruma pārbaudei HIV-2 infekcijas noteikšanai.

Imunoblotēšanas rezultātu novērtējums tiek veikts stingri saskaņā ar instrukcijām, kas pievienotas testa sistēmai. Ja nav norādījumu par rezultātu interpretāciju, jāizmanto PVO kritēriji.

Saņemot pozitīvus testa rezultātus HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas references stadijā un negatīvu pētījuma rezultātu ar imūnblotēšanas metodi, 6 mēnešus pēc pirmās pārbaudes tiek veikta obligāta atkārtota ekspertīze.

Ja imunoblotēšanas rezultāti 12 mēnešus pēc pirmā parauga izpētes paliek negatīvi vai nenoteikti, tad, ja nav riska faktoru, klīniskie simptomi vai citi faktori, kas saistīti ar HIV infekciju, subjekts tiek izņemts no ambulances novērošanas.

Starp seroloģiskajām metodēm nenoteiktu rezultātu gadījumā imūnblotu izmanto kā eksperta diagnozi. radioimunoprecipitācija(RIP). Tas ir balstīts uz vīrusu proteīnu izmantošanu, kas marķēti ar radioaktīvo jodu, un nogulsnes tiek noteiktas, izmantojot beta skaitītājus. Metodes trūkumi ietver augstās aprīkojuma izmaksas, nepieciešamību aprīkot īpašas telpas šiem nolūkiem.

Personas, kurām diagnosticēta HIV infekcija, tiek pakļautas pastāvīgai dinamiskai uzraudzībai ar obligātu laboratorisko izmeklēšanu ik pēc 6 mēnešiem.

Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) atklāj iepriekš pavairotās nukleotīdu sekvences, kas raksturīgas konkrētā patogēna genomam. Izolēta gēna vai tā fragmenta pavairošana, ko sauc par amplifikāciju, PCR ļauj veikt in vitro, izmantojot enzīmu termostabilu DNS polimerāzi. 2-3 stundu laikā PCR ļauj iegūt miljoniem konkrētas vīrusa sadaļas kopiju. HIV infekcijas laikā no šūnu RNS, tajā skaitā vīrusa RNS, ja tā tika reproducēta šūnā vai tika integrēta tās genomā, izmantojot reverso transkripciju un hibridizāciju ar marķētām oligonukleotīdu "zondēm", tiek iegūts pietiekams daudzums provīrusu DNS, lai. analīze, kas tiek atklāta un raksturota kvantitatīvi, kā arī saistībā ar piederību HIV genomam, nosakot DNS un vīrusam specifisko aminoskābju secību homoloģiju ar radioaktīvo vai citu zondes marķējumu. PCR jutība ir vīrusu gēnu noteikšana vienā no pieciem tūkstošiem šūnu.

PCR, tostarp kvantitatīvo, var izmantot tikai, lai noteiktu vīrusa slodzi uz plazmu, lai atrisinātu ierosināšanas problēmu. narkotiku ārstēšana pacientam vai mainot pretretrovīrusu līdzekli zāles. PCR nevar ieteikt HIV infekcijas diagnosticēšanai, jo pat visprogresīvākās tā formulēšanas metodes un reaģenti ļauj noteikt vīrusu slodzi, kas nav zemāka par noteiktu līmeni - 50 kopijas / ml. Un PCR iestatīšanas sarežģītība un augstās izmaksas (apmēram 200 USD) noliedz tās plašo izmantošanu kā ikdienas HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas metodi. Tādējādi PCR joprojām ir neaizstājama tikai, lai novērtētu plazmas vīrusu slodzi pacientiem ar jau noteikta diagnoze HIV infekcija, lai risinātu pacientu terapijas jautājumu.

Shematiski HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas posmi ir parādīti attēlā. viens.

Rīsi. 1. HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas stadijas

HIV infekcijas laikā iestājas "tumšā laboratorijas loga" periods, kad anti-HIV antivielu daudzums ir nepietiekams testa sistēmu jutībai. Šis periods svārstās no vienas nedēļas līdz trim mēnešiem no HIV inficēšanās brīža atkarībā no testa sistēmas jutības līmeņa. Ņemot vērā šo parādību, grūtības rodas, izmeklējot ziedotās asinis no personām, kuras atrodas minētajā HIV infekcijas periodā. Tāpēc lielākajā daļā pasaules valstu ir ieviesta sistēma, ka asinis var lietot tikai pēc 3-6 mēnešu uzglabāšanas, lai veiktu šo asins devu un to donoru obligāto HIV inficēšanās izmeklējumu. sastāvdaļas.

Primāro izpausmju stadiju raksturo replikācijas procesa aktivitāte. Iegūtā virēmija un antigēnēmija izraisa specifisku IgM klases antivielu veidošanos: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. P24 antigēnu dažiem inficētajiem var noteikt asinīs ar ELISA palīdzību jau 2 nedēļas pēc inficēšanās, un to var noteikt līdz 8. nedēļai. Nākamais iekšā klīniskā gaita HIV infekcija iezīmē otro p24 proteīna satura pieaugumu asinīs, tas iekrīt AIDS stadijas veidošanās periodā.

Pilnīgas serokonversijas parādīšanās, kad perifērajās asinīs tiek reģistrēts augsts IgG klases specifisko antivielu līmenis pret HIV gp41, p24, gpl20 strukturālajiem proteīniem, ievērojami atvieglo HIV infekcijas diagnostiku. Lielākā daļa komerciālo komplektu ir paredzēti, lai norādītu tikai šādas antivielas.

Grūtības noteikt antivielas HIV inficētiem pacientiem var rasties masīvas virēmijas un antigenēmijas periodos, kad pieejamās specifiskās antivielas asinīs tiek izmantotas līdz vīrusu daļiņu saistīšanai, un replikācijas process ir priekšā jaunu pretvīrusu antivielu ražošanai.

Indivīdiem ar sākotnēji novājinātu imūnsistēmu virēmija un antigenēmija parādās agrāk un saglabājas augstā līmenī līdz slimības iznākumam. Tajā pašā laikā šādiem pacientiem ir zems brīvo HIV antivielu saturs divu iemeslu dēļ - nepietiekama B-limfocītu antivielu ražošana un virionu un šķīstošo HIV proteīnu saistīšanās ar antivielām, tāpēc infekcijas noteikšanai testu sistēmas ar paaugstinātu. nepieciešama analīzes metožu jutība vai modifikācijas, nodrošinot antivielu atbrīvošanās stadiju no imūnkompleksiem.

Neskatoties uz specifisko HIV infekcijas marķieru pārpilnību, visbiežāk tiek noteikts kopējo antivielu klātbūtne pret HIV proteīniem. Termins "kopā" ​​nozīmē divu klašu antivielu (IgG un IgM) klātbūtni un plašu antivielu klāstu pret dažādiem, galvenokārt strukturāliem, HIV proteīniem.

CD4 šūnu noteikšana. Galvenais klīniskais un laboratoriskais rādītājs HIV infekcijas stadijas, pacientu imūnsistēmas destrukcijas pakāpes diagnosticēšanai ikdienā, bija CD4+ limfocītu satura noteikšana: līmeņa pazemināšanās zem 200 šūnām/mm3 ir Galvenais AIDS diagnosticēšanas kritērijs. Tiek uzskatīts, ka visiem HIV inficētiem indivīdiem, kuru CD4+ limfocītu skaits ir 200 šūnas/mm3 vai mazāk, nepieciešama gan pretvīrusu terapija, gan PCP profilakse. Un, lai gan 1/3 HIV inficēto ar CO4+-limfocītu skaitu, kas mazāks par 200 šūnām/mm3, nav klīniskās izpausmes, pieredze liecina, ka viņiem simptomi parādās nākamo 2 mēnešu laikā, tāpēc viņi visi tiek uzskatīti par AIDS stadijas pacientiem.

HIV infekcijas diagnoze agrīnā stadijā ir būtiska. No tā ir atkarīga terapijas sarežģītība un patoloģisko komplikāciju attīstība. Līdz šim ir daudz novatorisku pētījumu metožu, lai noteiktu tik briesmīgu diagnozi. Par to tiks runāts tālāk.

Kādas metodes ir pieejamas HIV infekcijas diagnosticēšanai?

Patiesībā HIV diagnosticēšanai ir daudz metožu. Vidēji tie ir sadalīti apakšgrupās - laboratorijas pētījumi, diferenciālizmeklēšana un aparatūra. Turklāt ir jāņem vērā diagnostikas pasākumu stadijas. Par visu šo un citiem aspektiem sīkāk parunāsim vēlāk.

Laboratorijas diagnostika

Apskatāmajai diagnostikas metodei ir nepieciešama ļoti specializēta laboratorija. Šādos apstākļos var identificēt šādas norādes:
  • Tiek noteiktas antivielas, patogēnu antigēni un imūnkompleksi.
  • Kad vīruss tiek atklāts, tas tiek kultivēts un tiek atklāts genoma materiāls un fermenti.
  • Tiek novērtēta imūnsistēmas funkcionalitāte.
  • Tiek veikta cilvēka imūndeficīta vīrusa izplatības epidemioloģiskā uzraudzība un monitorings.
  • Tiek pētīta izplatības dinamika un noteikta populācija.
  • Ir iespējams noteikt transplantācijas un asins pārliešanas drošības pakāpi.
Ja tiek konstatēts atbilstošs HIV patogēns, pacients tiek nosūtīts uz papildu izmeklēšanu. Pēc tam persona tiek reģistrēta, lai turpmāk kontrolētu slimības progresēšanu.

Diferenciāldiagnoze

Slimība tiek diferencēta dažādu iemeslu dēļ:
  • Pie pirmajiem HIV infekcijas simptomiem, kas ir akūtā fāzē, īpaši, ja ir mononukleozei līdzīgs sindroms. Diagnozes pamatā ir tādas patoloģijas kā infekciozā mononukleoze, sifiliss, masaliņas, adenovīruss, leikēmija akūta forma, jersinioze, hiperkeratoze.
  • Ja HIV pāriet uz noturīgas ģeneralizētas limfadenopātijas stadiju, tad tiek diferencētas slimības, kurās palielinās limfmezgli. Piemēram, limfoleikoze, sifiliss, toksoplazmoze, limfogranulomatoze. Šajā fāzē pacienta simptomi kļūst izteiktāki.
  • Ja tiek konstatētas sekundāras patoloģijas, tiek diferencēts imūndeficīts, kas radies uz noteiktu zāļu grupu - staru terapijas, glikokortikosteroīdu un citostatisko zāļu lietošanas fona. Imunitāte ievērojami samazinās arī tādās slimībās kā mieloma, limfoleikoze, onkoloģiskās neoplazmas utt.
  • Ja HIV atrodas mutes dobums, tad tiek diferencētas mutes gļotādas slimības.

Ekspress diagnostika

Līdz šim ir izstrādāti pat ātrie testi, pateicoties kuriem pēc 15 minūtēm ir iespējams noteikt HIV infekcijas klātbūtni. Ir vairāki sugas:
  • Visprecīzākais tests ir imūnhromatogrāfija. Tests sastāv no īpašām sloksnēm, uz kurām tiek uzliktas kapilārās asinis, urīns vai siekalas. Ja tiek atklātas antivielas pret HIV, sloksnei ir krāsa un kontroles līnija. Ja atbilde ir nē, ir redzama tikai līnija.
  • Komplekti mājas lietošanai OraSure Technologies1. Izstrādātājs - Amerika. Šo testu ir apstiprinājusi FDA.
  • Ir arī citi ātrās testi, taču tiem nav speciālistu apstiprinājuma, tāpēc tie nav vēlami testam.

Ja atklājas pozitīva reakcija cilvēka imūndeficīta vīrusa gadījumā ir nepieciešams papildus veikt atbilstošu izmeklēšanu klīniskā vidē.

Agrīna diagnostika

Agrīna HIV diagnostika pastāv, lai savlaicīgi noteiktu imūno bojājumu riskus. Sakarā ar to slimība tiek apturēta agrīnās stadijas izraisot citu cilvēku inficēšanos iekšējie orgāni tiek samazināts līdz minimumam.

Lai patstāvīgi diagnosticētu patoloģiju agrīnā stadijā, pievērsiet uzmanību simptomiem, kas pastāv šajā gadījumā:

polimerāzes ķēdes reakcija

PCR vai polimerāzes ķēdes reakciju izmanto, lai noteiktu jebkuru infekcijas izraisītāju, tostarp HIV vīrusu. Šajā gadījumā tiek noteikta tā RNS, un patogēnu var noteikt ļoti agrīnā stadijā (pēc inficēšanās jāpaiet vismaz 10 dienām).

Šī ir diezgan dārga diagnostika, taču dažos gadījumos tā var sniegt nepatiesu rezultātu. Tāpēc, veicot HIV skrīningu, papildus tiek izmantotas citas metodes.



Lai noteiktu HIV un komplikāciju, piemēram, AIDS, attīstības ātrumu, ir nepieciešama polimerāzes ķēdes reakcijas kvantitatīvā izpausme. Tas ļauj savlaicīgi noteikt HIV inficēta pacienta dzīves ilguma prognozi.

imūnblotēšana

Imūnblotēšana ir pēdējā pacienta izmeklēšanas metode pirms precīzas diagnozes noteikšanas. Tehnikas pamatā ir specializētas sloksnes (nitrocelulozes) izmantošana ar vīrusu proteīniem. Ārsts savāc venozās asinis un pēc tam nosūta tās apstrādei. Pēc šī procesa sūkalu olbaltumvielas tiek sadalītas želejveida vielā, pamatojoties uz molekulmasu un lādiņu. Šim nolūkam tiek izmantots aprīkojums ar aktīvo elektrisko lauku. Pēc tam iepriekš minēto sloksni ievieto šajā želejā un nosusina, tas ir, pakļauj blotēšanai. To veic specializētā kamerā.

Rezultātu nosaka asins proteīnu saistīšanās ar proteīniem, kas uzklāti uz nitrocelulozes sloksnes. Ja pacienta ķermenī ir HIV, tad atsevišķas līnijas ir caurspīdīgas. Ir daži indikatori, lai identificētu līnijas, kas norāda uz HIV klātbūtni. Bet ir arī zemi skaitļi. Šajā gadījumā pastāv attīstības risks sākuma stadija cilvēka imūndeficīta vīruss, onkoloģisko audzēju veidošanās, tuberkuloze, asins pārliešana.

ELISA tests

ELISA tests attiecas uz skrīninga metodi aizdomām par HIV. Pētījums tiek veikts laboratorijā. Tieši tur tiek radīti specifiski slimību proteīni, kas spēj notvert cilvēka ķermeņa ražotos proteīnus. Mijiedarbojoties ar reaģentiem, mainās indikatora krāsa. Tādējādi tiek atklāts nevis pats patogēns, bet gan antivielas pret vīrusu. Šis tests var noteikt cilvēka imūndeficīta vīrusu agrīnā attīstības stadijā.

Ir vairāki ELISA testu veidi, taču tiek izmantoti tikai jaunākie sasniegumi – 3. un 4. paaudze. Tehnikas pamatā ir asins šķidruma savākšana no vēnas. Ir noteikts preparāts - pacients nedrīkst ēst 8 stundas pirms pārbaudes. Tāpēc asinis tiek savāktas no rīta tukšā dūšā.

Kā tiek veikta diagnoze inkubācijas periodā?

HIV vīrusa inkubācijas periods ir 90 dienas. Šajā intervālā ir grūti noteikt patoloģijas klātbūtni, bet to var izdarīt, izmantojot PCR.

Pēc tam visu gadu cilvēks atrodas ārstu uzraudzībā un tiek veiktas vairākas pārbaudes. Tikai pēc šī perioda ir iespējams precīzi noteikt diagnozi - HIV.

Diagnozes iezīmes bērniem

Ja bērns piedzimst sievietei, kurai diagnosticēts cilvēka imūndeficīta vīruss, mazulis tiek izmeklēts pirmajos 3 dzīves gados. Fakts ir tāds, ka mātes antivielas šajā periodā var būt bērna asins šķidrumā. Bet tajā pašā laikā pat asins analīzes neapstiprina infekciju. Protams, ir daudz gadījumu, kad slimība tiek konstatēta tūlīt pēc piedzimšanas. Uzziniet vairāk par grūtniecību ar HIV infekciju.

Pirmie HIV testi bērnam tiek veikti otrajā dienā pēc dzimšanas. Tad pēc 2 mēnešu sasniegšanas, tad ik pēc 4 mēnešiem.

Lai atklātu patoloģiju bērnība tiek izmantotas seroloģiskās izmeklēšanas metodes, PCR. Tieši pēdējais slimības diagnostikas veids ļauj identificēt vīrusa DNS un RNS pirmajos mazuļa dzīves mēnešos. Šim nolūkam no bērna tiek savāktas asinis, kuras pēc tam ievieto mēģenē, kurā ir EDTA konservants. Tālāk materiāls tiek uzglabāts 2 dienas temperatūrā, kas nepārsniedz 8 grādus. Bet asiņu sasaldēšana nav pieņemama. Var izmantot arī sauso asins šķidrumu, ko iegūst no pilnām asinīm un izžāvē.


Diagnostikas stadijas

Diagnostikas pasākumi cilvēka imūndeficīta vīrusa noteikšanai tiek veikti trīs galvenajos posmos:
  • Iepriekšēja šķirošana, jeb skrīnings.
  • Atsauces diagnostika.
  • Apstiprinošais posms vai ekspertu diagnostika.

Skrīnings – iepriekšēja šķirošana

Pārbaudes sākotnējais posms ļauj noteikt kopējo antivielu daudzumu, izmantojot enzīmu imūnanalīzi, tas ir, ELISA. Informāciju par vīrusa klātbūtni var iegūt jau 3 mēnešus pēc inficēšanās. Bet bija gadījumi, kad patogēns tika atklāts agrākos posmos - pēc 3 nedēļām.

Jums jāzina, ka ELISA noteiktos apstākļos var dot viltus pozitīvu rezultātu. Tas var būt bērna piedzimšanas periodā ar autoimūnām slimībām (psoriāzi, reimatismu, sarkano vilkēdi utt.), Epšteina-Bara slimību un citām patoloģijām.

Atsauces diagnostika

Šajā posmā dažādi testi tiek izmantoti vismaz divas, ne vairāk kā trīs reizes. Ja divos gadījumos rezultāts ir pozitīvs, ir jāveic apstiprināšanas darbība.

Apstiprinājuma posms - eksperts

Šajā posmā diagnoze tiek veikta, izmantojot imūnblotēšanu. Antivielas tiek noteiktas atbilstoši noteiktām patogēna olbaltumvielām. Rezultāts parasti ir precīzs, taču ir kļūdaini pozitīvas atbildes gadījumi. Tas ir iespējams AIDS attīstības beigu stadijā un HIV slimības klusuma laikā. Tāpēc ir svarīgi pēc noteikta laika iziet papildu procedūru.

Kļūdas diagnostikas laikā


Lai cik paradoksāli tas nešķistu, pastāv iespēja iegūt viltus pozitīvu rezultātu. Tas parasti notiek mājas testēšanas laikā, īpaši gadījumos, kad tiek izmantotas ātrās pārbaudes. Klīniskā vidē tas ir iespējams tikai ar noteiktām slimībām vai stāvokļiem:

  • grūtniecības periods;
  • ķermeņa krusteniskā reakcija;
  • autoimūnas patoloģiski traucējumi;
  • saaukstēšanās akūtā stadijā;
  • onkoloģiskās neoplazmas;
  • tuberkuloze;
  • skleroze.

Iezīme – ja cilvēks ir inficēts ar vīrusiem un sēnītēm, tad arī testa rezultāts var būt nepatiess. Tas jo īpaši attiecas uz alerģiskiem stāvokļiem.

Sagatavošanās testēšanai

Ir ļoti svarīgi ievērot noteikumus, gatavojoties HIV testēšanai, jo no tā ir atkarīga rezultāta iegūšanas precizitāte:
  • Vispirms jāapmeklē atbilstošs speciālists, lai viņš varētu sniegt precīzus norādījumus par sagatavošanās darbībām.
  • Asins analīzes vienmēr tiek ņemtas tukšā dūšā. Tāpēc, pirms došanās uz klīniku, jūs nevarat ēst neko. Jūsu pēdējai ēdienreizei jābūt ne vēlāk kā pulksten 21:00.
  • Pārbaudes dienā ir aizliegts smēķēt.
  • Nelietojiet alkoholu iepriekšējā vakarā.
  • Ja lietojat kādas zāles, noteikti iepriekš konsultējieties ar savu ārstu. Tā kā daudzas zāles ir aizliegtas pirms HIV testu veikšanas.
  • Dažas dienas pirms analīzes savākšanas nav ieteicams veikt ultraskaņas izmeklēšanu.
  • Dienu vai divas pirms procedūras nav vēlams ēst pārlieku treknu pārtiku un lietot daudz saldumu.

HIV infekcijas diagnostika (video)

Vairāk par dažādām HIV diagnostikas metodēm varat uzzināt pie kvalificētiem speciālistiem. Lai to izdarītu, skatiet šo videoklipu.

HIV diagnostika ir viens no primārajiem uzdevumiem, ar ko saskaras dermatoveneroloģiskā dispansera darbinieki, kā arī poliklīnikas darbinieki.

Slimību ārsti raksturo kā ļoti mānīgu. To raksturo hroniska gaita, un to nevar pilnībā ārstēt. Ir svarīgi to atklāt savlaicīgi, lai to kontrolētu un novērstu nekontrolētu izplatīšanos. Kādas ir cilvēka imūndeficīta vīrusa pazīmes un kā viņi var inficēties, pacienti bieži interesējas.

Kādas ir slimības diagnostikas metodes, un kādas pazīmes ļauj aizdomāties par infekciju?

Mūsdienās no visur var dzirdēt par to, cik bīstama ir HIV infekcija. Tomēr daži cilvēki izskaidro, kas ir šīs briesmas. Tā rezultātā pacientiem ir nepilnīga informācija, un līdz ar to viņi neuztver draudus nopietni. Bet HIV ir ārkārtīgi bīstams. Tā tiek klasificēta kā lēni progresējoša vīrusu slimība, kurai ir nosliece uz hronisku gaitu. Šajā patoloģijā primāri tiek ietekmēta imūnsistēma.

Ārsti vērš pacientu uzmanību uz to, ka nāve nenotiek no paša imūndeficīta vīrusa kā tāda.

Cilvēks mirst no vienlaicīgām infekcijām, lai nodrošinātu pilnīgu aizsardzību pret kurām organisms vairs nespēj. Tas arī izraisa nāvi vēža audzēji, ar kuru tas nespēj cīnīties ar pazeminātu imunitāti.

Faktiski mehānisms, ar kuru HIV infekcija ietekmē imūnsistēmu, ir diezgan sarežģīts. Pēc ārstu domām, pacientiem tas nav rūpīgi jāsaprot. Pietiek zināt, ka slimība var samazināt imunitātes līmeni līdz kritiskām vērtībām. Tā rezultātā organisms nespēs aizsargāties pret dažādām ārējām ietekmēm, kas agrāk vai vēlāk novedīs pie nāves.

Kā notiek infekcija

Ir svarīgi saprast, ka HIV infekciju mūsdienās apvij ļoti dažādi mīti.

Pacienti ir ļoti slikti informēti par to, kad ir iespējams inficēties un kad veselība nav apdraudēta.

Vispirms jāatceras, ka HIV vidē ir ļoti nepastāvīgs. Tas nozīmē, ka patogēns spēj dzīvot pilnvērtīgi un ilgu laiku tikai iekšā cilvēka ķermenis. Viņš necieš karsēšanu virs 50 grādiem (nomirst acumirklī). Arī nespēj pretoties žāvēšanas procesiem. Ne visos ķermeņa šķidrumos ir pietiekami daudz vīrusu, lai infekcija varētu rasties.

Vislielākās briesmas ir:

  • asinis;
  • pre-cum;
  • spermatozoīdi;
  • izdalījumi no sievietes maksts;
  • limfa;
  • mātes piens.

Ja kāds no šiem šķidrumiem nonāk saskarē ar gļotādām, kurās ir mikrotraumas, vai ar traumu skartu ādu, rodas infekcija.

Tas ir iespējams arī tad, ja svešais šķidrums nonāk tieši asinsritē. Siekalas un asaras, pretēji plaši izplatītam uzskatam, nerada draudus. Pateicoties vīrusa īpašībām un tā zemajam izdzīvošanas līmenim, tas tiek pārraidīts vairākos veidos:

  • seksuālais veids, t.i. ar neaizsargātu dzimumaktu, kas neizbēgami ir saistīts ar bioloģisko šķidrumu un pret patogēnu uzņēmīgo ķermeņa gļotādu saskari;
  • parenterāls ceļš t.i. vīrusa pārnešana ar asinīm tās pārliešanas laikā vai nesterilu instrumentu izmantošanas dēļ medicīniskiem nolūkiem;
  • vertikālais ceļš t.i. no mātes bērnam (šodien, ja sieviete lieto pretretrovīrusu terapiju un atsakās barot bērnu ar krūti, bērna inficēšanās iespēja dzemdību laikā tiek samazināta līdz minimumam).

Ir svarīgi saprast, ka, ja infekcijai caur ādu nepieciešama mikrotrauma vai vaļējas brūces, tad tas nav obligāts nosacījums, lai inficētos caur gļotādu. Atšķirība ir izskaidrojama ar to, ka cilvēka ķermeņa gļotādām un ādai ir pilnībā atšķirīga struktūra. Šī atšķirība ir jāņem vērā.

Kā aizdomas par HIV

Daudzus pacientus interesē jautājums par to, kādas pazīmes parasti var izmantot, lai aizdomas par inficēšanos ar cilvēka imūndeficīta vīrusu.

  • nepamatota sistēmiskā tipa temperatūras paaugstināšanās, ko nevar izskaidrot ar citu infekciju un kas saglabājas ilgu laiku, neskatoties uz veiktajiem ārstēšanas pasākumiem;
  • spēcīgs limfmezglu palielinājums (pirmkārt, cieš cirkšņa zonas mezgli, taču ir iespējama arī to iesaistīšanās visā ķermenī);

  • smags svara zudums, ko nevar izskaidrot ar diētām, stresu, hormonālie traucējumi un citi iemesli;
  • sūdzības par izkārnījumu traucējumiem, kas ilgu laiku vajā pacientu, un nav iespējams atrast to rašanās iemeslu;
  • izteikta tendence uz jebkuru infekcijas slimību pāreju uz hroniskas formas, un patogēna raksturam nav lielas nozīmes, hroniski tiek reģistrētas gan baktēriju, gan vīrusu patoloģijas;
  • attīstās oportūnistiskās mikrofloras izraisītas slimības, kas neapdraud cilvēku, kura imunitāte ir pilnībā funkcionējoša (piemēram, mikoplazmoze, ureaplazmoze, kandidoze u.c.).

HIV infekcijas klīnika ir ļoti nespecifiska, kā saka ārsti. Šī iemesla dēļ bieži ir grūti noteikt diagnozi. Daudzi pacienti pilnībā ignorē satraucošos simptomus, dodot priekšroku nemeklēt medicīnisko palīdzību. Pat ja slimība ļoti ietekmē viņu vispārējo labsajūtu.

Ir svarīgi saprast, ka ilgstoši inficēšanās ar HIV var nebūt jūtama. Un, parādoties pirmajām pazīmēm, cilvēks tās var pat nesaistīt ar inficēšanās iespējamību un mēģināt ārstēties mājās.

Diagnostikas metodes

HIV laboratoriskā diagnostika ir izstrādāta jau ilgu laiku un veiksmīgi izmantota šīs bīstamās slimības diagnosticēšanai.

Slimību nevar noteikt tikai pēc simptomiem. Tāpēc bieži vien izšķiroša loma ir diagnozes apstiprināšanai, pamatojoties uz laboratorijas metodēm.

HIV diagnosticēšanai ir dažādas metodes. Krievijā, pirmkārt, priekšroka tiek dota imūnblotēšanai, kā arī ELISA reakcijām. Šīs metodes bieži izmanto kā skrīninga metodes, piemēram, pārbaudot medicīnas personālu.

ELISA sistēmas

Bieži pacienti jautā saviem ārstiem, kā sākt diagnostisko meklēšanu, ja ir aizdomas par inficēšanos ar cilvēka imūndeficīta vīrusu.

Jebkurš kompetents ārsts teiks, ka priekšroka jādod enzīmu imūnanalīzei. Tieši šī tehnika Krievijā ir pirmais diagnostikas posms.

ELISA princips ir vienkāršs. Ārsti laboratorijā radīja īpašas olbaltumvielas. Viņi spēj atklāt un mijiedarboties ar antivielām, ko organisms ražo, reaģējot uz HIV. Pēc tam sistēmai tiek pievienots īpašs indikatora ferments, kas maina savu krāsu. Pēdējā posmā materiāls tiek apstrādāts, izmantojot īpašu aparātu, un ārsts saņem gala rezultātu.

IFA ir ļoti populāra.

Pirmkārt, pateicoties tam, ka rezultātus var gūt arī tad, ja kopš patogēna ievadīšanas organismā nav pagājušas vairāk kā dažas nedēļas.

Ir svarīgi saprast, ka enzīmu imūntests nenosaka pašu vīrusu asinīs, bet gan antivielas pret to.

Daudziem cilvēkiem tie var sākties attīstīties vēlāk nekā divas nedēļas, kā rezultātā rezultāts var būt kļūdains. Ir vairākas ELISA testu paaudzes.

Vismodernākie un precīzākie ir tie, kas pieder 3. un 4. paaudzei. Ārsti atzīmē, ka, ja ir izvēle, vislabāk ir dot priekšroku Eiropas reaģentiem, jo ​​to precizitāte sasniedz 99%. Termiņi ELISA rezultātu iegūšanai ir vidēji no 2 līdz 10 dienām.

Kāpēc ELISA var būt nepatiesa

Ir svarīgi saprast, ka enzīmu imūntests var sniegt gan viltus pozitīvus, gan viltus negatīvus rezultātus. Lai gan risks šādai notikumu attīstībai ir ārkārtīgi mazs.

Pacients var iegūt viltus negatīvus rezultātus, ja tests veikts pārāk agri un antivielas vēl nav izveidojušās organismā.

Lai izslēgtu šādu reakciju, pacientiem ieteicams veikt analīzi vairākas reizes ar dažādiem laika intervāliem.

Dažās slimībās ir kļūdaini pozitīvs tests. Piemēram, pacientiem ar:

  • alkoholiskais hepatīts;
  • mieloma lielā skaitā;
  • dažas autoimūnas slimības;
  • sievietes grūtniecības laikā utt.

Šādās slimībās cilvēka asinis tiek papildinātas ar antivielām. Tie var līdzināties HIV antivielu struktūrai, kas sajauc reaģentus, izraisot reakciju. Protams, pēdējos gados testa sistēmas ir kļuvušas arvien jutīgākas. Tomēr kļūdainu rezultātu problēma vēl nav pilnībā atrisināta.

Imunoblotēšana

Mūsdienu apstākļos nav iespējams noteikt pozitīvu HIV diagnozi, paļaujoties tikai uz ELISA. Ir nepieciešams apstiprināt iegūtos rezultātus, ko veic, izmantojot imūnblotēšanas reakciju (imūnblotēšana, IB).

Lai veiktu IB, laboratorijā jābūt speciālām testa strēmelēm. Tie ir pārklāti ar vīrusu proteīniem. Pirms analīzes pacienta asinis, kas ņemtas no vēnas, tiek sagatavotas īpašā veidā.

Iegūto bioloģisko materiālu pievieno želejai, kurā olbaltumvielas tiek atdalītas pēc to svara. Pēc tam iegūtajā masā tiek nolaista iepriekš sagatavota sloksne.

Josla kļūst mitra (notiek blotēšana), uz tās tiek konstatētas joslas, ja materiāls satur HIV infekcijas proteīnus. Ja proteīnu nav, mitrināšana nemainās izskats svītras.

Ir vairākas imūnblotēšanas interpretācijas. Tomēr neatkarīgi no tā, kā konkrētā slimnīca vai laboratorija veic dekodēšanu, pareizas diagnozes varbūtība ir 99,9%.

Vai imūnblotēšana var dot nepareizus rezultātus, bieži brīnās pacienti? Jā, tas ir iespējams, piemēram, ja pacientam ir tuberkuloze, grūtniecība vai onkoloģija.

PCR, lai palīdzētu

PCR ir vēl viena metode, kas var diagnosticēt cilvēka imūndeficīta vīrusu asinīs un citos ķermeņa šķidrumos, kur tā koncentrācija ir diezgan augsta.

Pēc ārstu domām, polimerāzes ķēdes reakcija var dot pozitīvu rezultātu jau 10 dienas pēc pirmās ķermeņa saskares ar infekciju.

Ir svarīgi saprast, ka PCR dažos gadījumos dod viltus pozitīvus rezultātus. Tas izskaidrojams ar to, ka metodei ir ļoti augsta jutība.

Rezultātā tas bieži reaģē uz līdzīgām antivielām, norādot uz pilnīgi atšķirīgiem patoloģiskiem procesiem pacienta organismā.

Neskatoties uz augsto jutību un zemo viltus rezultātu iespējamību, PCR netiek plaši izmantots. Tas izskaidrojams ar vairākiem faktoriem. Pirmkārt, lai veiktu polimerāzes ķēdes reakciju, ir nepieciešams īpašs aprīkojums, kura cena ir diezgan augsta. Otrkārt, personālam, kas strādā ar iekārtām, jābūt augsti kvalificētam, kas arī var radīt grūtības. Šīs funkcijas apvienojumā padara PCR par dārgu diagnostikas metodi, un tāpēc tā nav pieejama ikvienam.

Neskatoties uz to, ka PCR nav skrīninga metode, to izmanto, piemēram, lai pārbaudītu jaundzimušo inficēšanos ar cilvēka imūndeficīta vīrusu.

Express sistēmas diagnostikai

Ārsti un zinātnieki ir veltījuši daudz pūļu, lai izveidotu ātrās pārbaudes HIV infekcijas novērtēšanai. Pēc mediķu domām, lietojot šīs sistēmas, rezultātu iespējams iegūt 15 minūšu laikā pēc pārbaudes veikšanas.

Ātrie HIV testi ir balstīti uz imūnhromatogrāfijas principu. Sistēma parasti ietver sloksni, kas piesūcināta ar īpašiem reaģentiem.

Pacienta uzdevums ir uzklāt asinis, spermu vai jebkuru citu bioloģisku šķidrumu, kas var saturēt vīrusa antivielas.

Ja tie tiek atrasti, tad uz sloksnes parādīsies divas krāsainas joslas, no kurām viena ir kontroles, bet otra ir diagnostikas. Ja tas netiek atklāts, tiks noteikta tikai kontroles josla.

Ir svarīgi saprast, ka eksprestesti nedod 100% garantiju, ka cilvēks nav inficēts vai, gluži pretēji, ir inficēts ar HIV. Jebkurā gadījumā ar viņu palīdzību iegūtie rezultāti ir jāapstiprina laboratorijā, izmantojot imūnblotēšanu.

Ekspress tipa testu sistēmas ir ērtas pacientiem, kuri vēlas nomierināties mājās. Tomēr, kā atzīmē ārsti, pat ja ar viņu palīdzību cilvēks saņēma negatīvu rezultātu, ja jums ir aizdomas par negatīvām izmaiņām organismā, jums tomēr jākonsultējas ar ārstu.

Pie kura ārsta man jāvēršas, ja ir aizdomas par infekciju?

Daudzi pacienti domā, pie kura ārsta viņiem jāsazinās, ja viņiem ir aizdomas par HIV infekciju. Pirmkārt, ieteicams apmeklēt venerologu. Tieši šis medicīnas darbinieks specializējas slimībās, kuras var seksuāli pārnēsāt no cilvēka uz cilvēku.

Venereologs varēs veikt kompetentu izmeklēšanu, apkopot anamnēzi un izlemt, kādi izmeklējumi pacientam nepieciešami precīzai diagnozei. Pēc saviem ieskatiem viņš var arī nosūtīt pacientu uz infekcijas slimību slimnīcu. It īpaši, ja viņam joprojām ir aizdomas, ka viņam ir HIV.

Cilvēka imūndeficīta vīruss ir izplatīta slimība. Ar to var saskarties jebkura persona, kas vada aktīvu seksuālo dzīvi.

Zināšanas par šīs slimības izplatības un diagnostikas iezīmēm mūsdienu realitātē ir ļoti svarīgas, ja pacients vēlas saglabāt savu veselību un ilgmūžību. Tikai savlaicīga vēršanās pie ārsta ļaus kontrolēt infekciju un pasargāt sevi no tās!

Savlaicīga HIV infekcijas diagnostika kļūst par ārkārtīgi svarīgu pasākumu, jo agrāka ārstēšana lielā mērā var noteikt tālākai attīstībai slimības un paildzina pacienta dzīvi. Pēdējos gados ir panākts ievērojams progress šīs briesmīgās slimības noteikšanas jomā: vecās pārbaudes sistēmas tiek aizstātas ar modernākām, izmeklēšanas metodes kļūst pieejamākas, un to precizitāte ir ievērojami palielināta.

Šajā rakstā mēs runāsim par modernas metodes HIV infekcijas diagnostiku, kas ir noderīgi zināt šīs problēmas savlaicīgai ārstēšanai un pacienta normālas dzīves kvalitātes uzturēšanai.

HIV diagnostikas metodes

Krievijā HIV infekcijas diagnosticēšanai tiek veikta standarta procedūra, kas ietver divus līmeņus:

  • ELISA testu sistēma (skrīninga analīze);
  • imūnblotēšana (IB).

Var izmantot arī citas diagnostikas metodes:

  • eksprestesti.

ELISA testu sistēmas

Diagnozes pirmajā posmā HIV infekcijas noteikšanai izmanto skrīninga testu (ELISA), kura pamatā ir HIV proteīni, kas izveidoti laboratorijās, kas uztver specifiskas antivielas, kas organismā veidojas, reaģējot uz infekciju. Pēc to mijiedarbības ar testa sistēmas reaģentiem (enzīmiem) mainās indikatora krāsa. Turklāt šīs krāsu izmaiņas tiek apstrādātas ar speciālu aprīkojumu, kas nosaka veiktās analīzes rezultātu.

Šādi ELISA testi spēj uzrādīt rezultātus dažu nedēļu laikā pēc HIV infekcijas ievadīšanas. Šī analīze nenosaka vīrusa klātbūtni, bet nosaka antivielu veidošanos pret to. Dažreiz cilvēka organismā antivielu veidošanās pret HIV sākas pēc 2 nedēļām pēc inficēšanās, bet lielākajai daļai cilvēku tās tiek ražotas vēlāk, pēc 3-6 nedēļām.

Ir četras ELISA testu paaudzes ar dažādu jutību. Pēdējos gados arvien biežāk tiek izmantotas III un IV paaudzes testu sistēmas, kuru pamatā ir sintētiskie peptīdi vai rekombinantie proteīni un kurām ir lielāka specifika un precizitāte. Tos var izmantot, lai diagnosticētu HIV infekciju, uzraudzītu HIV izplatību un nodrošinātu drošību, pārbaudot ziedotās asinis. III un IV paaudzes ELISA testu sistēmu precizitāte ir 93-99% (jutīgāki ir testi, kas tiek ražoti Rietumeiropā - 99%).

Lai veiktu ELISA testu, no pacienta vēnas ņem 5 ml asiņu. Starp pēdējo ēdienreizi un analīzi jābūt vismaz 8 stundām (parasti to veic no rīta tukšā dūšā). Šādu testu ieteicams veikt ne agrāk kā 3 nedēļas pēc iespējamās inficēšanās (piemēram, pēc neaizsargāta dzimumakta ar jaunu dzimumpartneri).

ELISA testa rezultāti tiek iegūti pēc 2-10 dienām:

  • negatīvs rezultāts: norāda uz HIV infekcijas neesamību un neprasa nosūtījumu pie speciālista;
  • viltus negatīvs rezultāts: var novērot infekcijas sākuma stadijā (līdz 3 nedēļām), AIDS vēlīnās stadijās ar smagu imūnsupresiju un ar nepareizu asins sagatavošanu;
  • viltus pozitīvs rezultāts: to var novērot dažu slimību un nepareizas asins sagatavošanas gadījumā;
  • pozitīvs rezultāts: norāda uz inficēšanos ar HIV infekciju, nepieciešama IB un pacienta nosūtīšana pie speciālista AIDS centrā.

Kāpēc ELISA tests var dot viltus pozitīvus rezultātus?

Nepareizi apstrādājot asinis vai pacientiem ar šādiem stāvokļiem un slimībām, var novērot viltus pozitīvus ELISA testa rezultātus HIV noteikšanai:

  • multiplā mieloma;
  • infekcijas slimības, ko izraisa Epšteina-Barra vīruss;
  • stāvoklis pēc ;
  • autoimūnas slimības;
  • uz grūtniecības fona;
  • stāvoklis pēc vakcinācijas.

Iepriekš aprakstīto iemeslu dēļ asinīs var būt nespecifiskas krusteniski reaģējošas antivielas, kuru veidošanos nav izraisījusi HIV infekcija.

Pēdējos gados viltus pozitīvu rezultātu biežums ir ievērojami samazinājies, jo tiek izmantotas III un IV paaudzes testu sistēmas, kas satur jutīgākus peptīdu un rekombinantos proteīnus (tie tiek sintezēti, izmantojot in vitro gēnu inženieriju). Pēc šādu ELISA testu izmantošanas viltus pozitīvu rezultātu biežums ir ievērojami samazinājies un ir aptuveni 0,02-0,5%.

Viltus pozitīvs rezultāts nenozīmē, ka cilvēks ir inficēts ar HIV. Šādos gadījumos PVO iesaka veikt citu ELISA testu (obligātā IV paaudze).

Pacienta asinis tiek nosūtītas uz atsauces vai arbitrāžas laboratoriju ar atzīmi "atkārtot" un pārbaudītas IV paaudzes ELISA testu sistēmā. Ja jaunās analīzes rezultāts ir negatīvs, pirmais rezultāts tiek atzīts par kļūdainu (viltus pozitīvu) un IB netiek veikts. Ja otrā testa rezultāts ir pozitīvs vai apšaubāms, pacientam 4–6 nedēļu laikā jāveic IB, lai apstiprinātu vai atspēkotu HIV infekciju.

imūnblotēšana

Galīgo HIV infekcijas diagnozi var veikt tikai pēc pozitīva imūnblotēšanas (IB) rezultāta iegūšanas. Tās īstenošanai tiek izmantota nitrocelulozes sloksne, uz kuras tiek uzklāti vīrusu proteīni.

Asins paraugu ņemšana IB tiek veikta no vēnas. Pēc tam tiek veikta īpaša apstrāde un tā serumā esošās olbaltumvielas tiek atdalītas īpašā želejā atbilstoši to lādiņam un molekulmasai (manipulācija tiek veikta uz speciāla aprīkojuma elektriskā lauka ietekmē). Uz asins seruma gēla tiek uzklāta nitrocelulozes sloksne un speciālā kamerā tiek veikta blotēšana (“blotēšana”). Sloksne tiek apstrādāta un, ja izmantotie materiāli satur antivielas pret HIV, tie saistās ar antigēnu joslām uz IB un parādās kā līnijas.

IB tiek uzskatīts par pozitīvu, ja:

  • saskaņā ar Amerikas CDC kritērijiem - uz sloksnes ir divas vai trīs līnijas gp41, p24, gp120 / gp160;
  • saskaņā ar Amerikas FDA kritērijiem - uz lentes ir divas līnijas p24, p31 un līnija gp41 vai gp120 / gp160.

99,9% gadījumu pozitīvs IB rezultāts norāda uz HIV infekciju.

Ja nav līniju - IB ir negatīvs.

Identificējot līnijas ar gp160, gp120 un gp41, IB ir apšaubāma. Šādu rezultātu var noteikt, ja:

  • onkoloģiskās slimības;
  • grūtniecība;
  • biežas asins pārliešanas.

Šādos gadījumos ir ieteicams veikt otru pētījumu, izmantojot cita uzņēmuma komplektu. Ja pēc papildu IB rezultāts paliek apšaubāms, tad novērošana ir nepieciešama sešus mēnešus (IB tiek veikta ik pēc 3 mēnešiem).

polimerāzes ķēdes reakcija

PCR tests var noteikt vīrusa RNS. Tā jutība ir diezgan augsta un ļauj atklāt HIV infekciju jau 10 dienas pēc inficēšanās. Dažos gadījumos PCR var dot viltus pozitīvus rezultātus, jo tā augstā jutība var reaģēt arī uz antivielām pret citām infekcijām.

Šī diagnostikas tehnika ir dārga, tai nepieciešama īpaša iekārta un augsti kvalificēti speciālisti. Šie iemesli neļauj to veikt iedzīvotāju masveida pārbaudēs.

PCR izmanto šādos gadījumos:

  • atklāt HIV jaundzimušajiem, kuri dzimuši HIV inficētām mātēm;
  • atklāt HIV "logu periodā" vai apšaubāmas IB gadījumā;
  • kontrolēt HIV koncentrāciju asinīs;
  • donoru asiņu izpētei.

Tikai ar PCR testu HIV diagnoze netiek noteikta, bet tiek veikta kā papildu diagnostikas metode strīdu risināšanai.


Ekspress metodes

Par vienu no jauninājumiem HIV diagnostikā kļuvuši eksprestesti, kuru rezultātus var novērtēt 10-15 minūtēs. Visefektīvākos un precīzākos rezultātus iegūst ar imūnhromatogrāfiskiem testiem, kuru pamatā ir kapilārās plūsmas princips. Tās ir īpašas sloksnes, uz kurām tiek uzklātas asinis vai citi testa šķidrumi (siekalas, urīns). Ja ir antivielas pret HIV, pēc 10-15 minūtēm uz testa parādās krāsaina un kontroles josla - pozitīvs rezultāts. Ja rezultāts ir negatīvs, parādās tikai kontroles līnija.

Tāpat kā ar ELISA testiem, ātrā testa rezultāti jāapstiprina ar IB analīzi. Tikai pēc tam var noteikt HIV infekcijas diagnozi.

Ir pieejami ekspreskomplekti testēšanai mājās. OraSure Technologies1 (ASV) tests ir FDA apstiprināts, pieejams bez receptes, un to var izmantot HIV noteikšanai. Pēc testa pozitīva rezultāta gadījumā pacientam ieteicams iziet pārbaudi specializētā centrā, lai apstiprinātu diagnozi.

Pārējos mājas lietošanai paredzētos testus FDA vēl nav apstiprinājusi, un to rezultāti var būt ļoti apšaubāmi.

Neskatoties uz to, ka ātrās pārbaudes precizitāte ir zemāka par IV paaudzes ELISA testiem, tos plaši izmanto iedzīvotāju papildu testēšanai.

Pārbaudīties uz HIV infekciju var jebkurā poliklīnikā, Centrālajā reģionālajā slimnīcā vai specializētajos AIDS centros. Krievijas teritorijā tie tiek turēti absolūti konfidenciāli vai anonīmi. Katrs pacients var sagaidīt medicīnisku vai psiholoģisku padomu pirms vai pēc analīzes. Par HIV testiem būs jāmaksā tikai komercārstniecības iestādēs, valsts klīnikās un slimnīcās tos veic bez maksas.

Informāciju par to, kā var inficēties ar HIV un kādi mīti pastāv par inficēšanās iespējām, lasiet

HIV infekcijas diagnoze ir svarīgs faktors ceļā uz ātru atveseļošanos process palīdz nodrošināt pacientam savlaicīgu terapiju.

HIV infekciju izraisa cilvēka imūndeficīta vīruss, kas aktīvi ietekmē visu pacienta imūnsistēmu, kā rezultātā tā tiek inhibēta un bez savlaicīgas iejaukšanās attīstās AIDS (visiem zināms iegūtais imūndeficīta sindroms). Izpratne par to, kā slimības process norisinās un kā tas ietekmē visu ķermeni, palīdz labāk izprast, kāpēc agrīna un precīza diagnostika ir svarīga. Pastāv milzīgs risks, ka parādīsies slimības, kas parasti nav raksturīgas cilvēkiem, kuriem ir normāla, spēcīga imūnsistēma. Bez savlaicīgas iejaukšanās šis stāvoklis novedīs pie nāves.

Simptomi

Ikvienam jāzina šīs izplatītās infekcijas simptomi un tās gaita. Bīstamība slēpjas apstāklī, ka HIV ir lēni progresējoša slimība, kurai agrīnā stadijā ir nespecifiskas pazīmes, zināmā mērā līdzīgas mononukleozes izpausmēm. Un tad kādu laiku slimība ir asimptomātiska. Ņemot to vērā, jums jāzina papildu klīniskās indikācijas, lai pārbaudītu pacientu uz HIV:

Diagnostika

HIV infekcijas laboratoriskajai diagnostikai, kā likums, ir 3 galvenie virzieni un mērķi:

  1. Tieša HIV infekcijas klātbūtnes noteikšana organismā.
  2. Noteikt, kurā no 8 slimības stadijām ir, un vienlaicīgu slimību noteikšana novājinātā organismā.
  3. Iespējamās progresēšanas prognozēšana slimības klīniskajā gaitā un pastāvīga notiekošās ārstēšanas uzraudzība, izmantojot antivielu skrīninga testus. Vērojot iespējamo blakus efekti no pretretrovīrusu zāļu lietošanas.

Pirmajos mēnešos, īpaši bez pienācīgas ārstēšanas, HIV inficētam cilvēkam strauji palielinās slodze uz visu ķermeni (tas ir, palielinās inficētās RNS saturs plazmā). Sakarā ar to, ka notiek strauja ne tikai šūnu, bet arī asiņu inficēšanās ar limfmezgli, kļūst iespējams noteikt provīrusu DNS.

Problēma ar diagnozi ir tāda, ka antivielas pret HIV neparādās uzreiz, bet ELISA metode un imūnblotēšana joprojām ir visuzticamākā.

Imunoloģijā šo parādību sauc par seroloģisko logu - tas ir vissvarīgākais periods no infekcijas sākuma līdz tāda daudzuma antivielu parādīšanās, ko var noteikt, izmantojot testus. Cik ilgi šis brīdis ilgst, atkarīgs no katra cilvēka imūnsistēmas stāvokļa individuāli, bet vidēji tas ilgst no 2 līdz 12 nedēļām. Šajā laikā pārbaudes parādīs, ka cilvēks ir vesels, bet patiesībā viņš jau ir inficēts. Dažreiz tas var ilgt līdz 3 gadiem, savukārt HIV antivielas, atrodoties cilvēka organismā, neizrāda nekādas aktivitātes pazīmes (tas notiek 10% inficēto).

HIV infekcijas diagnostika ietver 3 posmos asins analīzes, kas tiek veiktas īpašā laboratorijā. Pirmo sauc par skrīningu, ar tā palīdzību nosaka, vai ir antivielas pret HIV proteīniem.

Otrs diagnostikas veids ir atsauces, ar speciālu metožu palīdzību tie precizē vai apstiprina primāro skrīninga rezultātu. Trešais diagnostikas posms, kas ir arī eksperts, ir nepieciešams iepriekšējos laboratoriskās diagnostikas posmos konstatēto HIV infekcijas marķieru galīgai pārbaudei. Tas ir, tas ir nepieciešams, lai apstiprinātu un izslēgtu iespējamo kļūdu. Visi šie testi ir diezgan dārgi un sarežģīti, tāpēc tiek veikti tikai laboratorijās ar speciālu aprīkojumu. Asins seruma pētījumos tiek atzīmēts, ka dažkārt reakcija ir kļūdaini pozitīva vai nenoteikta. Tas notiek grūtniecēm un tiem, kam ir kādas autoimūnas slimības, un tādā gadījumā izmeklējumus veic atkārtoti pēc pusotra mēneša, kura laikā specifisko antivielu koncentrācija organismā sasniegs. nepieciešamais līmenis(ja tāds ir), un rezultāts būs precīzāks.

Ja vismaz viena no seroloģiskajām izpētes metodēm uzrādīja pozitīvu HIV rezultātu, tad turpmākai izmeklēšanai jābūt dinamiskai un regulārai līdz pilnīgai imūnsistēmas funkciju atjaunošanai.

Skatuves definīcija

Slimību definē šādi: Apmēram 2 nedēļas pēc iespējamās infekcijas tiek izmantota imūnblotēšanas metode, šim testam ir vislielākā jutība, aptuveni 97%. Ja rezultāts ir negatīvs, tiek izmantota cita, vēl jutīgāka metode - tā ir polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) vai ELISA. Teorētiski šis paaugstinātas jutības tests var noteikt vienu DNS uz 10 mg barotnes. Gadās, ka imūnblotēšana uzrāda negatīvu rezultātu, un ELISA ir pozitīva. Tas liecina, ka šajā posmā ir sākotnējais serokonversijas periods, tas ir, specifisko antivielu koncentrācija organismā palielināsies un pēc kāda laika atkārtota analīze, izmantojot imūnblotēšanu, parādīs pozitīvu rezultātu.

Kā tas strādā? Izmantojot polimerāzes ķēdes reakcijas metodi, tiek izgatavots liels skaits nukleīnskābes kopiju, jo vīruss atrodas proteīna apvalkā. Starp iegūtajām kopijām vīrusa skartās šūnas tiek noteiktas pēc to īpašās struktūras un ar marķētu enzīmu palīdzību. Šīs metodes problēma ir tā, ka šī diagnostikas metode ir pārāk dārga un netiek regulāri izmantota, ja vien pacients nav gatavs par to maksāt individuāli vai privātā klīnikā.

HIV infekcijas laboratoriskā diagnostika palīdz atšķirt 5 patoloģijas attīstības stadijas. Šie posmi iet vienādi, atšķirība ir tikai laika posmā, jo viss ir atkarīgs no katras personas imūnsistēmas stāvokļa.

  • inkubācijas latentā stadija;
  • primāro acīmredzamo pazīmju stadija;
  • asimptomātiska slimības gaita;
  • akūta HIV infekcija bez sekundārām slimībām;
  • akūta slimības forma ar sekundārām patoloģijām;
  • klīniski latentā stadija (ilgst līdz 7 gadiem);
  • sekundāro slimību stadija;
  • termināla stadija, kad slimība neatgriezeniski ietekmē praktiski cilvēka sistēmas un orgānus.

Saskaņā ar analīzēm un skarto šūnu skaitu tajā, saskaņā ar vispārējais stāvoklisārsti var diezgan precīzi noteikt, kurā slimības stadijā cilvēks atrodas.

inkubācijas periods. Šobrīd asinīs vēl nav konstatēti vīrusi un skartās HIV nukleīnskābes, tāpēc, nonākot asimptomātiskā seroloģiskā loga periodā, cilvēks var nezināt par savu slimību.

Primāro izpausmju stadija. Šajā laikā ir īpašības, kas tika uzskaitīti iepriekš, organismā veidojas antivielas.

Asimptomātiska stadija. Visbīstamākais, šajā slimības periodā pat tās pazīmes, kas parādījās otrajā stadijā, izgaist, slimība pāriet bez acīmredzamiem simptomiem.

Akūta HIV infekcija bez sekundāras slimības. Atkārtoti pārbaudot pacienta asinis, tiek konstatēti plašas plazmas leikocīti ar paralēlu limfocītu skaita samazināšanos. Palielināts pirmās saturs liecina par iekaisumu organismā, lielākajai daļai pacientu ir akūta infekcija.

Akūta HIV infekcija ar sekundārām slimībām. Sakarā ar straujo limfocītu samazināšanos organismā veidojas noturīgs imūndeficīts, pret kuru citi dažādas slimības. Piemēram, kandidoze, pneimonija, alerģijas, visa veida infekcijas, tonsilīts un citi.

latentais posms. Imūndeficīts progresē, slimība saasinās, un cilvēks pats zaudē vidēji 10% no ķermeņa svara.

Sekundāro slimību stadija. Arī šim priekšpēdējam periodam ir 3 posmi, tā sauktie 4A, 4B, 4C. Ja nav pienācīgas ārstēšanas, ķermeņa spēks un iespējas ir ievērojami izsmeltas.

Termināla posms. CD-šūnu kritiskais samazinājums ir mazāks par 0,05-109 šūnām/l. Antivielu koncentrācija ir praktiski noteikta.

Asins analīzes HIV noteikšanai bērniem

Ilgu laiku pēc piedzimšanas bērna asinīs ir mātes antivielas pret HIV infekciju. Asins analīze, kas tiek veikta mazuļa pirmajā dzīves mēnesī, var neapstiprināt infekciju, taču tas, ka nav antivielu pret HIV, nenozīmē, ka vīruss nav šķērsojis placentu. Šādi bērni ir jānovēro pirmos 3 gadus, veicot atbilstošus testus.

Lai pēc iespējas novērstu kļūdu, laboratorisko atbilžu rezultāti jāņem vērā tikai kopā ar vispārējās klīniskās izmeklēšanas datiem.

Mūsdienu HIV infekciju diagnostika gandrīz pilnībā izslēdz iespējamu kļūdu, izņemot dažus punktus, ir svarīgi to izmantot pēc iespējas agrāk.