Skríningový test v diagnostike infekcie HIV. Diagnóza HIV infekcie Štandardnou metódou diagnostiky HIV je

/ 16
Najhorší Najlepšie

Nasledujúce osoby podliehajú testovaniu na infekciu HIV:

2. Osoby s podozrením alebo potvrdenou diagnózou: bakteriálna infekcia u detí do 13 rokov, viacnásobná a opakujúca sa; kandidóza pažeráka, priedušnice, priedušiek alebo pľúc; invazívna rakovina krčka maternice; diseminovaná alebo extrapulmonárna kokcidioidomykóza; extrapulmonálna kryptokokóza; kryptosporidióza s hnačkou počas 1 mesiaca alebo dlhšie; cytomegalovírusové lézie iných orgánov, s výnimkou pečene, sleziny, lymfatických uzlín u pacientov starších ako 1 mesiac; cytomegalovírusová retinitída so stratou zraku; herpetická infekcia, ktorá spôsobuje multifokálne vredy, ktoré sa nezahoja do 1 mesiaca, alebo zápal priedušiek, zápal pľúc, ezofagitída; diseminovaná alebo extrapulmonárna histoplazmóza; izosporiáza s hnačkou dlhšie ako 1 mesiac; rozšírená alebo extrapulmonárna tuberkulóza; pľúcna tuberkulóza u dospelých alebo dospievajúcich starších ako 13 rokov; extrapulmonálna tuberkulóza; iné ochorenie spôsobené mykobaktériami, okrem M. tuberculosis diseminovaného alebo extrapulmonárneho; pneumónia spôsobená pneumocystou; progresívna multifokálna leukoencefalopatia; salmonela (okrem Salmonella typhi) septikémia, opakujúca sa; mozgová toxoiláza u detí starších ako 1 mesiac; Kaposiho sarkómy; lymfoidná intersticiálna pneumónia u detí mladších ako 13 rokov; Burkittov lymfóm; imunoblastický lymfóm; primárny mozgový lymfóm; syndróm chradnutia, hepatitída B, nosičstvo HBsAg; infekčná mononukleóza; recidivujúci herpes zoster u osôb starších ako 60 rokov; pohlavne prenosné choroby.

Vo vysoko špecializovanom laboratóriu sa vykonávajú:

a) stanovenie protilátok, antigénov a imunitných komplexov cirkulujúcich v krvi; kultivácia vírusu, detekcia jeho genómového materiálu a enzýmov;

b) hodnotenie funkcií bunkového spojenia imunitný systém. Hlavná úloha patrí metódam sérologickej diagnostiky zameranej na stanovenie protilátok, ako aj antigénov patogénov v krvi a iných biologických tekutinách tela.

Testovanie protilátok proti HIV sa vykonáva s cieľom:

a) bezpečnosť krvných transfúzií a transplantácií;

b) dohľad, testovanie na monitorovanie prevalencie infekcie HIV a štúdium dynamiky jej prevalencie v konkrétnej populácii;

c) diagnostika HIV infekcie, teda dobrovoľné vyšetrenie krvného séra prakticky zdravých ľudí alebo pacientov s rôznymi klinické príznaky a symptómy podobné infekcii HIV alebo AIDS.

Systém laboratórnej diagnostiky HIV infekcie je založený na trojstupňovom princípe. Prvým stupňom je skríning, určený na vykonávanie primárnych krvných testov na prítomnosť protilátok proti proteínom HIV. Druhý stupeň je referenčný - umožňuje pomocou špeciálnych metodických techník objasniť (potvrdiť) primárny pozitívny výsledok získaný v štádiu skríningu. Tretia etapa - expertná, je určená na konečné overenie prítomnosti a špecifickosti markerov HIV infekcie identifikovaných v predchádzajúcich etapách laboratórnej diagnostiky. Potreba niekoľkých stupňov laboratórnej diagnostiky je primárne spôsobená ekonomickými úvahami.

V praxi sa na identifikáciu ľudí infikovaných HIV s dostatočnou mierou istoty používa niekoľko testov:

ELISA (ELISA) test (enzyme-linked immunosorbent assay) na detekciu prvej úrovne sa vyznačuje vysokou citlivosťou, aj keď menšou špecifickosťou ako nasledujúce;

Immune blot (Western-blot), veľmi špecifický a najpoužívanejší test na rozlíšenie medzi HIV-1 a HIV-2;

Antigenemia p25-test, účinný v počiatočných štádiách infekcie;

Polymerázová reťazová reakcia (PCR).

V prípadoch hromadného skríningu vzoriek krvi sa odporúča testovať zmesi sér zo skupiny subjektov, zostavené tak, aby výsledné riedenie každej vzorky nepresiahlo 1:100. Ak je zmes séra a prúdu pozitívna, testuje sa každé sérum pozitívnej zmesi. Táto metóda nevedie k strate citlivosti pri ELISA aj imunoblote, ale znižuje náklady na pracovnú silu a náklady na vstupné vyšetrenie o 60 – 80 %.

V primárnej sérodiagnostike HIV infekcie sa celkové protilátky stanovujú pomocou skríningových skríningových testov – ELISA a aglutinačných reakcií. V druhom (arbitrážnom) štádiu sa používa zložitejší test - imunoblot, ktorý umožňuje nielen potvrdiť alebo zamietnuť pôvodný záver, ale aj na úrovni stanovenia protilátok proti jednotlivým proteínom vírusu.

Prepojený imunosorbentový test(ELISA) je hlavná a najpoužívanejšia metóda na stanovenie protilátok proti HIV. Nevýhody použitia ELISA pri sérodiagnostike infekcie HIV však zahŕňajú časté falošne pozitívne výsledky. V tomto ohľade nie je výsledok v teste ELISA základom pre záver, že subjekt je HIV-séropozitívny. Je to spôsobené nedostatočným čistením imunosorbentu od balastných proteínov; spontánna väzba sérových protilátok na plast, ak jeho oblasti neobsadené imunosorbentom sú nedostatočne blokované alebo nie sú blokované úplne špeciálnym neutrálnym proteínom; skrížená interakcia s HIV proteínmi imunosorbentu rôznych proteínov prítomných v krvi jedincov s určitými, častejšie autoimunitnými patologickými procesmi, ako je roztrúsená skleróza, SLE, tuberkulóza; s častým darcovstvom, infekčnými a onkologickými ochoreniami, popáleninami, tehotenstvom, opakovanými krvnými transfúziami, transplantáciami orgánov, tkanív, ako aj osoby na hemodialýze; s prítomnosťou reumatoidného faktora v krvi, čo často vyvoláva falošne pozitívne reakcie HIV; prítomnosť protilátok proti HIV gag proteínom a predovšetkým proti proteínu p24 v krvi vyšetrovaných osôb (samozrejme, protilátky sa tvoria proti exogénnym alebo endogénnym retrovírusom, ktoré doteraz neboli identifikované). Pretože anti-p24 je syntetizovaný bez zlyhania skoré štádia Sérokonverzia HIV, ďalšie imunologické sledovanie osôb s protilátkami proti HIV gag proteínom, ako aj ich vyňatie z darcovstva.

Citlivosť a špecifickosť enzýmového imunotestu sa neustále zvyšuje. Výsledkom je, že test ELISA štvrtej generácie nie je horší vo svojich diagnostických schopnostiach ako imunitný blotting a možno ho použiť nielen pri skríningu, ale aj v konfirmačnej fáze diagnostiky infekcie HIV [Smolskaya T. T., 1997].

Imunoblotting je konečná metóda sérologickej diagnostiky, umožňujúca urobiť konečný záver o HIV pozitivite alebo negativite subjektu.

Existuje jasná korelácia medzi výsledkami štúdie sér v imunoblote a ELISA - dvakrát pozitívne v ELISA s rôznymi testovacími systémami, sérum v 97-98% prípadov sa potom ukáže ako HIV pozitívne v imunoblote. Ak sa séra v teste ELISA ukážu ako pozitívne len v jednom z dvoch použitých testovacích systémov, na imunoblote sa detegujú pozitívne len v 4 % prípadov. V 5 % prípadov pri vykonávaní potvrdzujúcich štúdií na ľuďoch s pozitívnymi údajmi môže imunoblot ELISA poskytnúť „neurčité“ výsledky a medzi nimi asi v 20 % prípadov protilátky proti HIV-1 gag proteínom (p55, p25, p18 ). Prítomnosť protilátok len proti HIV-1 gag proteínom je dôvodom na dodatočné vyšetrenie krvného séra na infekciu HIV-2.

Vyhodnotenie výsledkov imunoblotovania sa vykonáva striktne v súlade s pokynmi pripojenými k testovaciemu systému. Pri absencii usmernenia o interpretácii výsledkov by sa mali použiť kritériá WHO.

Po prijatí pozitívnych výsledkov testov v referenčnom štádiu laboratórnej diagnostiky infekcie HIV a negatívneho výsledku štúdie metódou imunitného prenosu sa 6 mesiacov po prvom vyšetrení vykoná povinná opakovaná odborná diagnostika.

Ak výsledky imunoblotingu 12 mesiacov po štúdii prvej vzorky zostanú negatívne alebo neurčité, potom pri absencii rizikových faktorov, klinické príznaky alebo iných faktorov spojených s infekciou HIV, je subjekt odstránený z dispenzárneho pozorovania.

Zo sérologických metód sa v prípade neurčitých výsledkov používa ako expertná diagnóza imunoblot. rádioimunoprecipitácia(RIP). Je založená na použití vírusových proteínov značených rádioaktívnym jódom a precipitáty sa detegujú pomocou beta čítačov. Nevýhody metódy zahŕňajú vysoké náklady na vybavenie, potrebu vybaviť špeciálne miestnosti na tieto účely.

Osoby s diagnózou HIV infekcie podliehajú neustálemu dynamickému monitorovaniu s povinným laboratórnym vyšetrením každých 6 mesiacov.

Polymerázová reťazová reakcia (PCR) odhaľuje vopred namnožené nukleotidové sekvencie špecifické pre genóm daného patogénu. Izolované množenie génu alebo jeho fragmentu, nazývané amplifikácia, PCR umožňuje uskutočniť in vitro pomocou enzýmu termostabilnej DNA polymerázy. Počas 2-3 hodín vám PCR umožňuje získať milióny kópií konkrétnej časti vírusu. Počas infekcie HIV sa z bunkovej RNA vrátane RNA vírusu, ak bola reprodukovaná v bunke alebo bola integrovaná do jej genómu, pomocou reverznej transkripcie a hybridizácie s označenými oligonukleotidovými „sondami“ získa dostatočné množstvo provírusovej DNA na analýza, ktorá sa kvantitatívne deteguje a charakterizuje, ako aj vo vzťahu k príslušnosti ku genómu HIV, s použitím rádioaktívnej alebo inej sondovej značky, ktorá stanovuje homológiu DNA a vírusovo špecifických aminokyselinových sekvencií. Citlivosť PCR je detekcia vírusových génov v jednej z päťtisíc buniek.

PCR, vrátane kvantitatívnej, sa môže použiť len na stanovenie vírusovej záťaže v plazme, aby sa vyriešil problém iniciácie medikamentózna liečba pacienta alebo zmenou antiretrovírusového lieku lieky. PCR nemožno odporučiť na diagnostiku infekcie HIV, pretože aj najmodernejšie metódy jej formulácie a činidiel umožňujú určiť vírusovú záťaž nie nižšiu ako určitá úroveň - 50 kópií / ml. A zložitosť nastavenia PCR a jej vysoké náklady (približne 200 dolárov) rušia jej rozsiahle použitie ako metódy každodennej laboratórnej diagnostiky infekcie HIV. PCR teda zostáva nepostrádateľná len na hodnotenie plazmatickej vírusovej záťaže u pacientov s už stanovená diagnóza HIV infekcie s cieľom riešiť problém terapie pacientov.

Schematicky sú štádiá laboratórnej diagnostiky HIV infekcie znázornené na obr. jeden.

Ryža. 1. Etapy laboratórnej diagnostiky HIV infekcie

Počas HIV infekcie nastáva obdobie „tmavého laboratórneho okna“, kedy množstvo anti-HIV protilátok nestačí na citlivosť testovacích systémov. Toto obdobie sa pohybuje od jedného týždňa do troch mesiacov od okamihu infekcie HIV, v závislosti od úrovne citlivosti testovacieho systému. Vzhľadom na tento jav vznikajú ťažkosti pri vyšetrovaní darovanej krvi od osôb, ktoré sú v uvedenom období HIV infekcie. Preto je vo väčšine krajín sveta zavedený systém používania krvi až po jej skladovaní 3-6 mesiacov, aby sa u darcov týchto dávok krvi a jej darcov vykonalo povinné opätovné vyšetrenie na HIV infekciu. komponentov.

Štádium primárnych prejavov je charakterizované aktivitou replikačného procesu. Výsledná virémia a antigenémia spôsobujú tvorbu špecifických protilátok triedy IgM: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. Antigén p24 u niektorých infikovaných môže byť detekovaný v krvi testom ELISA už 2 týždne po infekcii a môže byť stanovený až do 8. týždňa. Ďalej v klinický priebeh Infekcia HIV znamená druhý vzostup obsahu proteínu p24 v krvi, spadá do obdobia vzniku štádia AIDS.

Výskyt úplnej sérokonverzie, keď je v periférnej krvi zaznamenaná vysoká hladina špecifických protilátok triedy IgG proti štrukturálnym proteínom HIV gp41, p24, gpl20, výrazne uľahčuje diagnostiku infekcie HIV. Väčšina komerčných súprav je navrhnutá tak, aby indikovala práve takéto protilátky.

Ťažkosti pri zisťovaní protilátok u pacientov infikovaných HIV môžu nastať v obdobiach masívnej virémie a antigenémie, keď sa dostupné špecifické protilátky v krvi spotrebúvajú na viazanie vírusových častíc a replikačný proces predbieha produkciu nových antivírusových protilátok.

U jedincov s pôvodne oslabeným imunitným systémom sa virémia a antigenémia objavia skôr a zostávajú na vysokej úrovni až do výsledku ochorenia. Takíto pacienti majú zároveň nízky obsah voľných protilátok proti HIV, a to z dvoch dôvodov – nedostatočná tvorba protilátok B-lymfocytmi a protilátková väzba viriónov a rozpustných HIV proteínov, preto sa na stanovenie infekcie testujú systémy so zvýšeným je potrebná citlivosť alebo modifikácie analytických metód, ktoré poskytujú štádium uvoľňovania protilátok z imunitných komplexov.

Napriek množstvu špecifických markerov infekcie HIV sa najčastejšie stanovuje prítomnosť celkových protilátok proti proteínom HIV. Pojem "celkový" znamená prítomnosť dvoch tried protilátok (IgG a IgM) a širokého spektra protilátok proti rôznym, predovšetkým štrukturálnym, HIV proteínom.

Stanovenie buniek CD4. Hlavným klinickým a laboratórnym ukazovateľom pre diagnostiku štádia HIV infekcie, stupňa deštrukcie imunitného systému u pacientov v bežnom živote, bolo stanovenie obsahu CD4+ lymfocytov: pokles hladiny pod 200 buniek/mm3 je tzv. hlavné kritérium diagnostiky AIDS. Predpokladá sa, že všetci jedinci infikovaní HIV s počtom CD4+ lymfocytov 200 buniek/mm3 alebo menej vyžadujú antivírusovú terapiu aj profylaxiu PCP. A hoci 1/3 HIV infikovaných s počtom CO4+-lymfocytov nižším ako 200 buniek/mm3 nemá klinické prejavy Skúsenosti ukázali, že sa u nich objavia symptómy v priebehu nasledujúcich 2 mesiacov, takže sú všetci považovaní za pacientov v štádiu AIDS.

Diagnóza infekcie HIV v počiatočnom štádiu je nevyhnutná. Z toho závisí zložitosť terapie a vývoj patologických komplikácií. K dnešnému dňu existuje veľa inovatívnych výskumných metód na identifikáciu takejto hroznej diagnózy. O tom sa bude diskutovať ďalej.

Aké metódy sú dostupné na diagnostikovanie infekcie HIV?

Laboratórna diagnostika

• Stanovujú sa protilátky, antigény patogénov a imunitné komplexy.
• Keď sa zistí vírus, je kultivovaný a deteguje sa genómový materiál a enzýmy.
• Hodnotí sa funkčnosť imunitného systému.
• Vykonáva sa epidemiologický dohľad a monitorovanie prevalencie vírusu ľudskej imunodeficiencie.
• Študuje sa distribučná dynamika a určuje sa populácia.
• Je možné určiť stupeň bezpečnosti transplantácie a transfúzie krvi.

Odlišná diagnóza

• Pri prvých príznakoch infekcie HIV, ktorá je v akútnej fáze, najmä ak ide o syndróm podobný mononukleóze. Diagnóza je založená na takých patológiách, ako je infekčná mononukleóza, syfilis, rubeola, adenovírus, leukémia v akútna forma yersinióza, hyperkeratóza.
• Ak HIV prechádza do štádia generalizovanej lymfadenopatie pretrvávajúcej povahy, potom sa rozlišujú choroby, pri ktorých sa lymfatické uzliny zvyšujú. Napríklad lymfocytová leukémia, syfilis, toxoplazmóza, lymfogranulomatóza. V tejto fáze sa symptómy pacienta stávajú výraznejšími.
• Ak sa zistia sekundárne patológie, diferencuje sa imunodeficiencia, ktorá vznikla na pozadí užívania určitých skupín liekov - radiačnej terapie, užívania glukokortikosteroidov a cytostatických liekov. Imunita je výrazne znížená aj pri ochoreniach ako myelóm, lymfoidná leukémia, onkologické novotvary a pod.
• Ak sa HIV nachádza v ústna dutina, potom sa rozlišujú ochorenia ústnej sliznice.

Expresná diagnostika

• Najpresnejší test je imunochromatografický. Test pozostáva zo špeciálnych prúžkov, na ktoré sa aplikuje kapilárna krv, moč alebo sliny. Ak sa zistia protilátky proti HIV, prúžok má farbu a kontrolnú čiaru. Ak je odpoveď nie, je viditeľný iba riadok.
• Súpravy domáce použitie Technológia OraSure1. Vývojár - Amerika. Tento test bol schválený FDA.
• Existujú aj iné rýchle testy, ktoré však nemajú schválenie špecialistov, a preto sú pre test nežiaduce.

Ak sa odhalí pozitívna reakcia na vírus ľudskej imunodeficiencie je potrebné dodatočne vykonať príslušné vyšetrenie v klinickom prostredí.

Včasná diagnóza

Aby ste mohli nezávisle diagnostikovať patológiu v počiatočných štádiách, venujte pozornosť príznakom, ktoré v tomto prípade existujú:

polymerická reťazová reakcia

Ide o pomerne drahú diagnostiku, ale v niektorých prípadoch môže poskytnúť falošný výsledok. Preto sa pri skríningu HIV dodatočne používajú aj iné metódy.

imunitný blotting

Výsledok je určený väzbou krvných bielkovín na bielkoviny aplikované na nitrocelulózový prúžok. Ak je HIV prítomný v tele pacienta, potom sú jednotlivé čiary priesvitné. Existujú určité indikátory identifikácie čiar, ktoré signalizujú prítomnosť HIV. Sú však aj nízke čísla. V tomto prípade existuje riziko rozvoja počiatočná fáza vírus ľudskej imunodeficiencie, vznik onkologických nádorov, tuberkulóza, transfúzia krvi.

ELISA test

Existuje niekoľko typov testov ELISA, ale používa sa len najnovší vývoj – 3. a 4. generácia. Technika je založená na odbere krvnej tekutiny zo žily. Existuje určitá príprava - pacient by nemal jesť 8 hodín pred testom. Preto sa krv odoberá ráno nalačno.

Ako sa diagnostikuje počas inkubačnej doby?

Potom je človek počas celého roka pod prísnym dohľadom lekárov a absolvuje viaceré vyšetrenia. Až po tomto období je možné presne stanoviť diagnózu – HIV.

Charakteristiky diagnostiky u detí

Prvé testy na HIV sa u dieťaťa robia na druhý deň po narodení. Potom po dosiahnutí 2 mesiacov, potom každé 4 mesiace.

Na zistenie patológie v detstvo používajú sa sérologické vyšetrovacie metódy, PCR. Práve posledný typ diagnózy ochorenia umožňuje identifikovať DNA a RNA vírusu už v prvých mesiacoch života bábätka. Na tento účel sa dieťaťu odoberie krv, ktorá sa následne vloží do skúmavky s konzervačnou látkou EDTA. Ďalej sa materiál skladuje 2 dni pri teplote nepresahujúcej 8 stupňov. Ale zmrazenie krvi nie je prijateľné. Môže sa použiť aj suchá krvná tekutina, ktorá sa získava z plnej krvi a suší sa.

Etapy diagnostiky

• Predtriedenie, aka skríning.
• Referenčná diagnostika.
• Konfirmačná fáza alebo odborná diagnostika.

Screening - predtriedenie

Musíte vedieť, že ELISA môže za určitých podmienok poskytnúť falošne pozitívny výsledok. Môže to byť počas obdobia nosenia dieťaťa s autoimunitnými ochoreniami (psoriáza, reumatizmus, lupus atď.), Epstein-Barovou chorobou a inými patológiami.

Referenčná diagnostika

Etapa potvrdenia - expert

Chyby počas diagnostiky

Akokoľvek sa to môže zdať paradoxné, existuje možnosť získať falošne pozitívny výsledok. Stáva sa to zvyčajne počas domáceho testovania, najmä v prípadoch, keď sa používajú rýchle testy. V klinickom prostredí je to možné len pri určitých ochoreniach alebo stavoch:

• obdobie tehotenstva;
• krížová reakcia tela;
• autoimunitné patologické poruchy;
• prechladnutie v akútnom štádiu;
• onkologické novotvary;
• tuberkulóza;
• skleróza.

Funkcia - ak je osoba infikovaná vírusmi a hubami, výsledok testu môže byť tiež falošný. To platí najmä pri alergických stavoch.

Príprava na testovanie

• V prvom rade musíte navštíviť príslušného odborníka, aby vám dal presné inštrukcie o prípravných činnostiach.
• Krvné testy sa odoberajú vždy nalačno. Preto pred odchodom na kliniku nemôžete nič jesť. Vaše posledné jedlo by malo byť najneskôr o 21:00.
• V deň testu je zakázané fajčiť.
• Večer predtým nepite alkohol.
• Ak užívate nejaké lieky, určite sa vopred poraďte s lekárom. Pretože mnohé lieky sú pred podaním testov na HIV zakázané.
• Niekoľko dní pred odberom analýzy sa neodporúča vykonávať ultrazvukové vyšetrenie.
• Deň až dva pred procedúrou nie je vhodné jesť nadmerne tučné jedlá a konzumovať veľa sladkostí.

Diagnóza infekcie HIV (video)

Diagnostika HIV je jednou z prvoradých úloh, s ktorými sa stretávajú zamestnanci dermatovenerologickej ambulancie, ale aj personál polikliniky.

Ochorenie lekári charakterizujú ako veľmi zákerné. Vyznačuje sa chronickým priebehom a nedá sa úplne liečiť. Je dôležité ho odhaliť včas, aby sme ho dostali pod kontrolu a zabránili nekontrolovanému šíreniu. Aké sú vlastnosti vírusu ľudskej imunodeficiencie a ako sa môžu infikovať, pacienti sa často zaujímajú.

Aké sú metódy diagnostiky ochorenia a aké znaky umožňujú podozrenie na infekciu?

Dnes môžete odkiaľkoľvek počuť o tom, aká nebezpečná je infekcia HIV. Málokto však vysvetľuje, v čom spočíva toto nebezpečenstvo. Výsledkom je, že pacienti majú neúplný súbor informácií a v dôsledku toho neberú hrozbu vážne. Ale HIV je mimoriadne nebezpečné. Je klasifikovaný ako pomaly progresívne vírusové ochorenie, náchylné na chronický priebeh. Pri tejto patológii je primárne ovplyvnený imunitný systém.

Lekári upozorňujú pacientov na skutočnosť, že smrť nenastáva na samotný vírus imunodeficiencie ako taký.

Osoba zomiera na sprievodné infekcie, aby poskytla plnú ochranu, proti ktorej telo už nie je schopné. Spôsobuje aj smrť rakovinové nádory, s ktorými nie je schopný bojovať so zníženou imunitou.

V skutočnosti je mechanizmus, ktorým infekcia HIV ovplyvňuje imunitný systém, pomerne zložitý. Pacienti jej podľa lekárov nemusia dôkladne rozumieť. Stačí vedieť, že ochorenie môže znížiť úroveň imunity na kritické hodnoty. V dôsledku toho sa telo nebude vedieť brániť rôznym vonkajším vplyvom, ktoré skôr či neskôr povedú k smrti.

Ako dochádza k infekcii

Je dôležité pochopiť, že infekcia HIV je dnes obklopená širokou škálou mýtov.

Pacienti sú veľmi zle informovaní o tom, kedy je možné sa nakaziť a kedy je zdravie mimo ohrozenia života.

Prvá vec, ktorú si treba zapamätať, je, že HIV je v životnom prostredí veľmi nestály. Znamená to, že patogén schopný plnohodnotne a dlhodobo žiť len v Ľudské telo. Neznáša zahrievanie nad 50 stupňov (okamžite zomrie). Tiež nie je schopný odolať procesom sušenia. Nie všetky telesné tekutiny obsahujú dostatok vírusu na to, aby došlo k infekcii.

Najväčšie nebezpečenstvo je:

• krv;
• pre-cum;
• spermie;
• výtok zo ženskej vagíny;
• lymfy;
• materské mlieko.

Ak sa niektorá z týchto tekutín dostane do kontaktu so sliznicami, v ktorých sú mikrotraumy, alebo s kožou postihnutou poranením, dochádza k infekcii.

Je tiež možné, ak sa cudzia tekutina dostane priamo do krvného obehu. Sliny a slzy, na rozdiel od všeobecného presvedčenia, nepredstavujú hrozbu. Vzhľadom na vlastnosti vírusu a jeho nízku mieru prežitia sa prenáša niekoľkými spôsobmi:

• sexuálnym spôsobom t.j. s nechráneným pohlavným stykom, ktorý nevyhnutne zahŕňa kontakt biologických tekutín a slizníc tela náchylných na patogén;
• parenterálna cesta t.j. prenos vírusu krvou počas jej transfúzie alebo v dôsledku použitia nesterilných nástrojov na lekárske účely;
• vertikálna dráha t.j. z matky na dieťa (dnes, ak žena užíva antiretrovírusovú liečbu a odmieta dojčiť, pravdepodobnosť infekcie dieťaťa počas pôrodu je minimalizovaná).

Je dôležité pochopiť, že ak je pre infekciu cez kožu potrebná mikrotrauma alebo otvorené rany, potom to nie je nevyhnutná podmienka pre infekciu cez sliznicu. Rozdiel je vysvetlený skutočnosťou, že sliznice a pokožka ľudského tela majú úplne odlišná štruktúra. Tento rozdiel treba brať do úvahy.

Ako mať podozrenie na HIV

Mnoho pacientov sa zaujíma o otázku, aké znaky možno zvyčajne použiť na podozrenie na infekciu vírusom ľudskej imunodeficiencie.

• bezdôvodné zvýšenie teploty systémového typu, ktoré nemožno vysvetliť inou infekciou a ktoré napriek opatreniam prijatým na liečbu dlhodobo pretrváva;
• silné zvýšenie veľkosti lymfatických uzlín (v prvom rade trpia uzliny v oblasti slabín, ale je možné aj ich zapojenie do celého tela);

• prudký úbytok hmotnosti, ktorý nemožno vysvetliť diétami, stresom, hormonálne poruchy a iné dôvody;
• sťažnosti na poruchy stolice, ktoré pacienta dlho prenasledujú, a nie je možné nájsť dôvod, prečo sa objavili;
• výrazná tendencia k prechodu akýchkoľvek infekčných chorôb na chronické formy a na povahe patogénu nezáleží, zaznamenávajú sa bakteriálne aj vírusové patológie;
• vyvíjajú sa choroby vyvolané oportúnnou mikroflórou, ktoré nepredstavujú hrozbu pre osobu, ktorej imunita je plne funkčná (napríklad mykoplazmóza, ureaplazmóza, kandidóza atď.).

Klinika infekcie HIV je veľmi nešpecifická, ako hovoria lekári. Z tohto dôvodu je často ťažké stanoviť diagnózu. Mnohí pacienti alarmujúce príznaky úplne ignorujú a radšej nevyhľadajú lekársku pomoc. A to aj v prípade, že choroba výrazne ovplyvňuje ich celkovú pohodu.

Je dôležité pochopiť, že infekcia HIV sa po dlhú dobu nemusí vôbec prejaviť. A keď sa objavia prvé príznaky, človek ich nemusí ani spájať s možnosťou jeho infekcie a pokúša sa liečiť doma.

Diagnostické metódy

Laboratórna diagnostika HIV bola vyvinutá už dlho a úspešne sa používa na diagnostiku tohto nebezpečného ochorenia.

Choroba sa nedá identifikovať iba podľa symptómov. Preto často rozhodujúcu úlohu zohráva potvrdenie diagnózy na základe laboratórnych metód.

Existujú rôzne metódy diagnostiky HIV. V Rusku sa v prvom rade uprednostňuje imunitný blotting, ako aj reakcie ELISA. Tieto metódy sa často používajú ako skríningové metódy, napríklad pri kontrole zdravotníckeho personálu.

Systémy ELISA

Pacienti sa často pýtajú svojich lekárov, ako začať diagnostické vyhľadávanie podozrenia na infekciu vírusom ľudskej imunodeficiencie.

Každý kompetentný lekár povie, že by sa mala uprednostniť enzýmová imunoanalýza. Práve táto technika v Rusku je prvou diagnostickou etapou.

Princíp ELISA je jednoduchý. Lekári v laboratóriu vytvorili špeciálne proteíny. Sú schopné detekovať a interagovať s protilátkami produkovanými telom v reakcii na vystavenie HIV. Potom sa do systému pridá špeciálny indikačný enzým, ktorý zmení jeho farbu. V záverečnej fáze sa materiál spracuje pomocou špeciálneho prístroja a lekár dostane konečný výsledok.

IFA je veľmi populárna.

V prvom rade kvôli tomu, že výsledky môžete dosiahnuť aj vtedy, ak od zavedenia patogénu do tela neuplynulo viac ako niekoľko týždňov.

Je dôležité pochopiť, že enzýmová imunoanalýza neurčuje samotný vírus v krvi, ale protilátky proti nemu.

U mnohých ľudí sa môžu začať rozvíjať neskôr ako po dvoch týždňoch, čo môže spôsobiť, že výsledok bude chybný. Existuje niekoľko generácií testov ELISA.

Najmodernejšie a najpresnejšie sú tie, ktoré patria do 3. a 4. generácie. Lekári poznamenávajú, že ak existuje možnosť výberu, je najlepšie uprednostniť európske činidlá, pretože ich presnosť dosahuje 99%. Termíny na získanie výsledkov ELISA sú v priemere od 2 do 10 dní.

Prečo môže byť ELISA nepravdivá

Je dôležité pochopiť, že enzýmová imunoanalýza môže poskytnúť falošne pozitívne aj falošne negatívne výsledky. Aj keď riziko takéhoto vývoja udalostí je extrémne malé.

Pacient môže dostať falošne negatívne výsledky, ak bol test vykonaný príliš skoro a v tele sa ešte nevytvorili protilátky.

Na vylúčenie takejto reakcie sa pacientom odporúča vykonať analýzu niekoľkokrát v rôznych časových intervaloch.

Pri niektorých ochoreniach sa vyskytuje falošne pozitívny test. Napríklad pacienti s:

• alkoholická hepatitída;
• myelóm vo veľkom počte;
• niektoré autoimunitné ochorenia;
• ženy počas tehotenstva atď.

Pri takýchto ochoreniach sa ľudská krv dopĺňa protilátkami. Štruktúrou sa môžu podobať HIV protilátkam, čo zamieňa reagencie a vyvoláva reakciu. Samozrejme, testovacie systémy sú v posledných rokoch čoraz citlivejšie. Problém falošných výsledkov však ešte nie je úplne vyriešený.

Imunoblotting

V moderných podmienkach nie je možné urobiť pozitívnu diagnózu HIV, spoliehajúc sa iba na ELISA. Je potrebné potvrdiť získané výsledky, ktoré sa vykonávajú pomocou reakcie imunitného prenosu (immunoblotting, IB).

Na vykonanie IB musia byť v laboratóriu prítomné špeciálne testovacie prúžky. Sú obalené vírusovými proteínmi. Pred rozborom sa pacientovi krv odobratá zo žily špeciálnym spôsobom pripraví.

Výsledný biologický materiál sa pridá do gélu, v ktorom sa oddelia proteíny podľa ich hmotnosti. Potom sa do výslednej hmoty spustí vopred pripravený pás.

Pás sa namočí (dochádza k škvrnám), pásy sa na ňom zistia, ak materiál obsahuje proteíny infekcie HIV. Ak proteíny chýbajú, zmáčanie sa nemení vzhľad pruhy.

Existuje niekoľko interpretácií imunoblottingu. Avšak bez ohľadu na to, ako konkrétna nemocnica alebo laboratórium vykonáva dekódovanie, pravdepodobnosť správnej diagnózy je 99,9 %.

Môže imunobloting poskytnúť nesprávne výsledky, často sa pýtajú pacienti? Áno, je to možné, ak má napríklad pacientka tuberkulózu, je tehotná, alebo trpí onkológiou.

PCR pomôcť

PCR je ďalšou metódou, ktorá dokáže diagnostikovať vírus ľudskej imunodeficiencie v krvi a iných telesných tekutinách, kde je jeho koncentrácia dosť vysoká.

Podľa lekárov môže polymerázová reťazová reakcia poskytnúť pozitívny výsledok už 10 dní po prvom kontakte tela s infekciou.

Je dôležité pochopiť, že PCR v niektorých prípadoch poskytuje falošne pozitívne výsledky. Vysvetľuje to skutočnosť, že metóda má veľmi vysokú citlivosť.

V dôsledku toho často reaguje na podobné protilátky, čo naznačuje úplne odlišné patologické procesy v tele pacienta.

Napriek vysokej citlivosti a nízkej pravdepodobnosti falošných výsledkov sa PCR veľmi nepoužíva. Vysvetľuje to niekoľko faktorov. Po prvé, na vykonanie polymerázovej reťazovej reakcie je potrebné špeciálne vybavenie, ktorého cena je pomerne vysoká. Po druhé, personál pracujúci so zariadením musí byť vysoko kvalifikovaný, čo môže tiež spôsobiť ťažkosti. Vďaka týmto vlastnostiam je PCR nákladná diagnostická metóda a v dôsledku toho nie je dostupná pre každého.

Napriek tomu, že PCR nie je skríningová metóda, používa sa napríklad na testovanie novorodenca na infekciu vírusom ľudskej imunodeficiencie.

Expresné systémy pre diagnostiku

Lekári a vedci vynaložili veľa úsilia na vytvorenie rýchlych testov na posúdenie infekcie HIV. Podľa lekárov je pri použití týchto systémov možné získať výsledok do 15 minút po vykonaní testu.

Rýchle testy HIV sú založené na princípe imunochromatografie. Systém zvyčajne obsahuje pásik impregnovaný špeciálnymi činidlami.

Úlohou pacienta je aplikovať krv, semeno alebo inú biologickú tekutinu, ktorá môže obsahovať protilátky proti vírusu.

Ak sa nájdu, na prúžku sa objavia dva farebné pásy, z ktorých jeden je kontrolný a druhý je diagnostický. Ak sa nezistí, zistí sa iba kontrolné pásmo.

Je dôležité pochopiť, že rýchle testy nedávajú 100% záruku, že osoba nie je infikovaná alebo naopak je infikovaná HIV. V každom prípade výsledky získané s ich pomocou musia byť potvrdené v laboratóriu pomocou imunoblotingu.

Testovacie systémy expresného typu sú vhodné pre pacientov, ktorí sa chcú upokojiť doma. Ako však lekári poznamenávajú, aj keď s ich pomocou človek dostal negatívny výsledok, ak máte podozrenie na negatívne zmeny v tele, mali by ste sa stále poradiť s lekárom.

Ktorého lekára mám kontaktovať, ak mám podozrenie na infekciu?

Mnohí pacienti sa pýtajú, ktorého lekára by mali kontaktovať, ak majú podozrenie na infekciu HIV. V prvom rade sa odporúča navštíviť venereológa. Práve tento zdravotnícky pracovník sa špecializuje na choroby, ktoré sa môžu prenášať z človeka na človeka sexuálne.

Venerológ bude schopný vykonať kompetentné vyšetrenie, zhromaždiť anamnézu a rozhodnúť, aké vyšetrenia pacient potrebuje na presnú diagnózu. Podľa vlastného uváženia môže pacienta poslať aj do infekčnej nemocnice. Najmä ak má stále podozrenie, že má HIV.

Vírus ľudskej imunitnej nedostatočnosti je bežné ochorenie. Každý, kto vedie aktívny sexuálny život, môže čeliť.

Znalosť charakteristík šírenia a diagnostiky tejto choroby v modernej realite je životne dôležitá, ak si pacient chce zachovať zdravie a dlhovekosť. Len včasné odvolanie sa na lekára vám umožní dostať infekciu pod kontrolu a chrániť sa pred ňou!

Včasná diagnostika infekcie HIV sa stáva mimoriadne dôležitým opatrením, pretože skoršia liečba môže do značnej miery rozhodnúť ďalší vývoj choroby a predĺžiť život pacienta. V posledných rokoch došlo v oblasti odhaľovania tohto hrozného ochorenia k výraznému pokroku: staré testovacie systémy sa nahrádzajú vyspelejšími, vyšetrovacie metódy sú dostupnejšie a ich presnosť sa výrazne zvyšuje.

V tomto článku budeme hovoriť o moderné metódy diagnostika infekcie HIV, ktorú je užitočné vedieť pre včasnú liečbu tohto problému a udržanie normálnej kvality života pacienta.

Metódy diagnostiky HIV

V Rusku sa na diagnostiku infekcie HIV vykonáva štandardný postup, ktorý zahŕňa dve úrovne:

• testovací systém ELISA (skríningová analýza);
• imunitný blotting (IB).

Môžu sa použiť aj iné diagnostické metódy:

• expresné testy.

Testovacie systémy ELISA

V prvej fáze diagnostiky sa na zistenie infekcie HIV používa skríningový test (ELISA), ktorý je založený na proteínoch HIV vytvorených v laboratóriách, ktoré zachytávajú špecifické protilátky produkované v tele ako odpoveď na infekciu. Po ich interakcii s činidlami (enzýmami) testovacieho systému sa farba indikátora zmení. Ďalej sú tieto farebné zmeny spracované na špeciálnom zariadení, ktoré určuje výsledok vykonanej analýzy.

Takéto testy ELISA sú schopné ukázať výsledky v priebehu niekoľkých týždňov po zavedení infekcie HIV. Táto analýza neurčuje prítomnosť vírusu, ale zisťuje tvorbu protilátok proti nemu. Niekedy sa v ľudskom tele tvorba protilátok proti HIV začína po 2 týždňoch po infekcii, ale u väčšiny ľudí sa vytvárajú neskôr, po 3-6 týždňoch.

Existujú štyri generácie testov ELISA s rôznou citlivosťou. V posledných rokoch sa častejšie používajú testovacie systémy generácie III a IV, ktoré sú založené na syntetických peptidoch alebo rekombinantných proteínoch a majú väčšiu špecifickosť a presnosť. Môžu sa použiť na diagnostiku infekcie HIV, sledovanie prevalencie HIV a zaistenie bezpečnosti pri testovaní darovanej krvi. Presnosť testovacích systémov ELISA III a IV generácie je 93-99% (citlivejšie sú testy, ktoré sa vyrábajú v západnej Európe - 99%).

Na vykonanie testu ELISA sa pacientovi odoberie 5 ml krvi zo žily. Medzi posledným jedlom a analýzou by malo byť najmenej 8 hodín (spravidla sa vykonáva ráno na lačný žalúdok). Takýto test sa odporúča vykonať najskôr 3 týždne po údajnej infekcii (napríklad po nechránenom pohlavnom styku s novým sexuálnym partnerom).

Výsledky testu ELISA sa získajú po 2-10 dňoch:

• negatívny výsledok: naznačuje neprítomnosť infekcie HIV a nevyžaduje odporúčanie špecialistovi;
• falošne negatívny výsledok: možno pozorovať v počiatočných štádiách infekcie (do 3 týždňov), v neskorých štádiách AIDS so závažným potlačením imunity a s nesprávnou prípravou krvi;
• falošne pozitívny výsledok: možno ho pozorovať pri niektorých ochoreniach a pri nesprávnej príprave krvi;
• pozitívny výsledok: indikuje infekciu HIV infekciou, vyžaduje IB a odoslanie pacienta k špecialistovi v AIDS centre.

Prečo môže test ELISA poskytnúť falošne pozitívne výsledky?

Falošne pozitívne výsledky testu ELISA na HIV možno pozorovať pri nesprávnom spracovaní krvi alebo u pacientov s takými stavmi a chorobami:

• mnohopočetný myelóm;
• infekčné choroby vyvolané vírusom Epstein-Barrovej;
• stav po ;
• autoimunitné ochorenia;
• na pozadí tehotenstva;
• stav po očkovaní.

Z vyššie opísaných dôvodov môžu byť v krvi prítomné nešpecifické skrížene reagujúce protilátky, ktorých tvorba nebola vyvolaná infekciou HIV.

V posledných rokoch sa frekvencia falošne pozitívnych výsledkov výrazne znížila vďaka použitiu testovacích systémov III. a IV generácie, ktoré obsahujú citlivejšie peptidy a rekombinantné proteíny (sú syntetizované pomocou in vitro genetického inžinierstva). Po použití takýchto testov ELISA sa frekvencia falošne pozitívnych výsledkov výrazne znížila a je asi 0,02-0,5%.

Falošne pozitívny výsledok neznamená, že osoba je infikovaná vírusom HIV. V takýchto prípadoch WHO odporúča ďalší test ELISA (povinná IV generácia).

Krv pacienta je odoslaná do referenčného alebo arbitrážneho laboratória označeného ako „opakovať“ a testovaná na testovacom systéme IV generácie ELISA. Ak je výsledok novej analýzy negatívny, potom sa prvý výsledok považuje za chybný (falošne pozitívny) a IB sa nevykoná. Ak je výsledok počas druhého testu pozitívny alebo pochybný, pacient je povinný podstúpiť IB za 4-6 týždňov na potvrdenie alebo vyvrátenie infekcie HIV.

imunitný blotting

Definitívnu diagnózu infekcie HIV možno urobiť až po získaní pozitívneho výsledku imunitného prenosu (IB). Na jeho realizáciu sa používa nitrocelulózový pásik, na ktorý sú aplikované vírusové proteíny.

Odber krvi na IB sa vykonáva zo žily. Potom sa podrobí špeciálnemu ošetreniu a proteíny obsiahnuté v jeho sére sa oddelia v špeciálnom géli podľa ich náboja a molekulovej hmotnosti (manipulácia sa vykonáva na špeciálnom zariadení pod vplyvom elektrického poľa). Na gél z krvného séra sa nanesie nitrocelulózový pásik a v špeciálnej komore sa vykoná blotovanie („blotovanie“). Prúžok sa spracuje a ak použité materiály obsahujú protilátky proti HIV, potom sa naviažu na antigénne pásy na IB a objavia sa ako čiary.

IB sa považuje za pozitívny, ak:

• podľa amerických kritérií CDC - na pásiku sú dva alebo tri riadky gp41, p24, gp120 / gp160;
• podľa kritérií amerického FDA - na prúžku sú dva riadky p24, p31 a riadok gp41 alebo gp120 / gp160.

V 99,9% prípadov pozitívny výsledok IB naznačuje infekciu HIV.

Pri absencii čiar - IB je negatívny.

Pri identifikácii línií s gp160, gp120 a gp41 je IB pochybná. Takýto výsledok možno zistiť, keď:

• onkologické ochorenia;
• tehotenstvo;
• časté krvné transfúzie.

V takýchto prípadoch sa odporúča vykonať druhú štúdiu s použitím súpravy od inej spoločnosti. Ak po ďalšej IB zostáva výsledok pochybný, potom je potrebné sledovanie počas šiestich mesiacov (IB sa vykonáva každé 3 mesiace).

polymerická reťazová reakcia

PCR test dokáže odhaliť RNA vírusu. Jeho citlivosť je pomerne vysoká a umožňuje odhaliť infekciu HIV už 10 dní po infekcii. V niektorých prípadoch môže PCR poskytnúť falošne pozitívne výsledky, pretože jej vysoká citlivosť môže reagovať aj na protilátky proti iným infekciám.

Táto diagnostická technika je drahá, vyžaduje špeciálne vybavenie a vysokokvalifikovaných odborníkov. Tieto dôvody neumožňujú uskutočniť ho pri masovom testovaní populácie.

PCR sa používa v týchto prípadoch:

• na zistenie HIV u novorodencov, ktorí sa narodili matkám infikovaným HIV;
• na zistenie HIV v „období okna“ alebo v prípade pochybnej IB;
• kontrolovať koncentráciu HIV v krvi;
• na štúdium darcovskej krvi.

Iba pomocou testu PCR sa diagnostika HIV nevykonáva, ale vykonáva sa ako dodatočná diagnostická metóda na riešenie sporov.

Expresné metódy

Jednou z noviniek v diagnostike HIV sa stali rýchle testy, ktorých výsledky je možné posúdiť za 10-15 minút. Najefektívnejšie a najpresnejšie výsledky sa dosahujú imunochromatografickými testami založenými na princípe kapilárneho toku. Sú to špeciálne prúžky, na ktoré sa nanáša krv alebo iné testovacie tekutiny (sliny, moč). V prítomnosti protilátok proti HIV sa po 10-15 minútach na teste objaví farebný a kontrolný prúžok - pozitívny výsledok. Ak je výsledok negatívny, zobrazí sa iba kontrolná čiara.

Rovnako ako pri testoch ELISA, výsledky rýchleho testu by sa mali potvrdiť analýzou IB. Až potom je možné diagnostikovať infekciu HIV.

Na domáce testovanie existujú expresné súpravy. Test OraSure Technologies1 (USA) je schválený FDA, je dostupný bez lekárskeho predpisu a možno ho použiť na zistenie HIV. Po teste sa v prípade pozitívneho výsledku pacientovi odporúča absolvovať vyšetrenie v špecializovanom centre na potvrdenie diagnózy.

Zvyšné testy na domáce použitie ešte neboli schválené FDA a ich výsledky môžu byť veľmi otázne.

Napriek skutočnosti, že rýchle testy majú nižšiu presnosť ako testy ELISA IV generácie, sú široko používané na dodatočné testovanie populácie.

Na HIV infekciu sa môžete nechať otestovať na ktorejkoľvek poliklinike, Ústrednej regionálnej nemocnici alebo v špecializovaných AIDS centrách. Na území Ruska sú držané absolútne dôverne alebo anonymne. Každý pacient môže očakávať, že pred analýzou alebo po nej dostane lekársku alebo psychologickú radu. Za testy HIV budete musieť platiť iba v komerčných zdravotníckych zariadeniach a na verejných klinikách a v nemocniciach sa vykonávajú bezplatne.

Ak chcete získať informácie o tom, ako sa môžete nakaziť HIV a aké mýty existujú o možnostiach nakazenia, prečítajte si

Diagnóza infekcie HIV je dôležitým faktorom na ceste k rýchlemu uzdraveniu pomáha tento proces zabezpečiť pacientovi včasnú terapiu.

Infekcia HIV je spôsobená vírusom ľudskej imunodeficiencie, ktorý aktívne ovplyvňuje celý imunitný systém pacienta, v dôsledku čoho je inhibovaný a AIDS sa rozvinie bez včasného zásahu (syndróm získanej imunitnej nedostatočnosti, ktorý pozná každý). Pochopenie toho, ako proces choroby funguje a ako ovplyvňuje celé telo, pomáha lepšie pochopiť, prečo je dôležitá včasná a presná diagnóza. Existuje obrovské riziko, že vzniknú choroby, ktoré zvyčajne nie sú charakteristické pre ľudí s normálnym silným imunitným systémom. Bez včasného zásahu tento stav povedie k smrti.

Symptómy

Každý by mal poznať príznaky tejto bežnej infekcie a jej priebeh. Nebezpečenstvo spočíva v tom, že HIV je pomaly postupujúce ochorenie, ktoré má v počiatočných štádiách nešpecifické znaky, do istej miery podobné prejavom mononukleózy. A potom je choroba nejaký čas asymptomatická. Vzhľadom na to potrebujete poznať ďalšie klinické indikácie na testovanie pacienta na HIV:

Diagnostika

Laboratórna diagnostika infekcie HIV má spravidla 3 hlavné smery a ciele:

1. Priame stanovenie prítomnosti infekcie HIV v tele.
2. Určenie, v ktorom z 8 štádií sa choroba nachádza, a identifikácia sprievodných chorôb v oslabenom tele.
3. Predikcia možnej progresie v klinickom priebehu ochorenia a neustále sledovanie prebiehajúcej liečby pomocou skríningových testov na protilátky. Sledovanie možného vedľajšie účinky z užívania antiretrovírusových liekov.

V prvých mesiacoch, najmä pri absencii správnej liečby, osoba infikovaná HIV zaznamená rýchle zvýšenie záťaže celého tela (to znamená zvýšenie obsahu infikovanej RNA v plazme). Vzhľadom na to, že dochádza k rýchlej infekcii nielen buniek, ale aj krvi s lymfatické uzliny je možné určiť provírusovú DNA.

Problém pri stanovení diagnózy je v tom, že protilátky proti HIV sa neobjavia okamžite, no najspoľahlivejšia zostáva metóda ELISA a imunoblotting.

V imunológii sa tento jav nazýva sérologické okno - to je najdôležitejšie obdobie od začiatku infekcie po objavenie sa takého množstva protilátok, ktoré je možné zistiť pomocou testov. Ako dlho táto chvíľa trvá, závisí od stavu imunitného systému každého človeka individuálne, no v priemere trvá od 2 do 12 týždňov. V tomto čase testy ukážu, že človek je zdravý, no v skutočnosti je už nakazený. Niekedy to môže trvať až 3 roky, zatiaľ čo protilátky proti HIV v ľudskom tele nevykazujú žiadne známky aktivity (to sa stáva u 10 % infikovaných).

Diagnóza infekcie HIV zahŕňa 3 stupne krvných testov vykonaných v špeciálnom laboratóriu. Prvý sa nazýva skríning, pomocou ktorého sa zisťuje, či existujú protilátky proti proteínom HIV.

Druhý spôsob diagnostiky je referenčný, pomocou špeciálnych metód objasnia alebo potvrdia výsledok primárneho skríningu. Tretia diagnostická etapa, ktorá je tiež expertná, je potrebná na konečné overenie markerov infekcie HIV, ktoré boli identifikované v predchádzajúcich etapách laboratórnej diagnostiky. To znamená, že je potrebný na potvrdenie a vylúčenie možnej chyby. Všetky tieto testy sú dosť drahé a zložité, a preto sa vykonávajú iba v laboratóriách so špeciálnym vybavením. Pri štúdiách krvného séra sa zistilo, že niekedy je reakcia buď falošne pozitívna alebo neurčitá. Stáva sa to u tehotných žien a u tých, ktorí majú nejaké autoimunitné ochorenie, v takom prípade sa testy opakujú po mesiaci a pol, počas ktorých koncentrácia špecifických protilátok v tele dosiahne požadovaná úroveň(ak existuje) a výsledok bude presnejší.

Ak aspoň jedna zo sérologických metód výskumu ukázala pozitívny výsledok na HIV, potom by ďalšie vyšetrenie malo byť dynamické a pravidelné až do úplného obnovenia funkcií imunitného systému.

Definícia štádia

Ochorenie je definované nasledovne: Približne 2 týždne po podozrení na infekciu sa používa metóda imunoblotovania, tento test má najvyššiu citlivosť, približne 97 %. Ak je výsledok negatívny, používa sa iná, ešte citlivejšia metóda – ide o polymerázovú reťazovú reakciu (PCR) alebo ELISA. Teoreticky môže tento hypersenzitívny test detegovať jednu DNA na 10 mg média. Stáva sa, že imunoblotting ukazuje negatívny výsledok a test ELISA je pozitívny. To naznačuje, že v tomto štádiu je počiatočné obdobie sérokonverzie, to znamená, že koncentrácia špecifických protilátok v tele sa zvýši a opätovná analýza pomocou imunoblotingu po chvíli ukáže pozitívny výsledok.

Ako to funguje? Pomocou metódy polymerázovej reťazovej reakcie sa vytvorí veľké množstvo kópií nukleovej kyseliny, pretože vírus je v proteínovom obale. Medzi výslednými kópiami sú bunky ovplyvnené vírusom určené svojou charakteristickou štruktúrou a pomocou značených enzýmov. Problémom tejto metódy je, že táto diagnostická metóda je príliš drahá a bežne sa nepoužíva, pokiaľ si ju pacient nie je ochotný zaplatiť individuálne alebo v súkromnej ambulancii.

Laboratórna diagnostika infekcie HIV pomáha rozlíšiť 5 štádií vývoja patológie. Tieto štádiá prechádzajú rovnako, rozdiel je len v časovom rámci, keďže všetko závisí od stavu imunitného systému každého jednotlivého človeka.

• latentné štádium inkubácie;
• štádium primárnych zjavných znakov;
• asymptomatický priebeh ochorenia;
• akútna infekcia HIV bez sekundárnych ochorení;
• akútna forma ochorenia so sekundárnymi patológiami;
• klinicky latentné štádium (trvá až 7 rokov);
• štádium sekundárnych chorôb;
• terminálne štádium, kedy sú prakticky ľudské systémy a orgány nezvratne postihnuté chorobou.

Podľa rozborov a počtu postihnutých buniek v nej podľa Všeobecná podmienka lekári vedia celkom presne určiť, v akom štádiu choroby sa človek nachádza.

Inkubačná doba. V súčasnosti ešte nie sú v krvi detegované vírusy a ovplyvnené nukleové kyseliny HIV, a preto, keď človek spadne do obdobia asymptomatického sérologického okna, nemusí vedieť o svojej chorobe.

Štádium primárnych prejavov. V tejto dobe existujú vlastnosti, ktoré boli uvedené vyššie, sa v tele tvoria protilátky.

Asymptomatické štádium. Najnebezpečnejšie je, že v tomto období ochorenia ustúpia aj tie znaky, ktoré sa objavili v druhom štádiu, ochorenie vymizne bez zjavných príznakov.

Akútna infekcia HIV bez sekundárneho ochorenia. Pri opätovnom vyšetrení krvi pacienta sa zistia široké plazmatické leukocyty s paralelným poklesom počtu lymfocytov. Zvýšený obsah prvého naznačuje zápal v tele, väčšina pacientov má akútnu infekciu.

Akútna infekcia HIV so sekundárnymi ochoreniami. V dôsledku rýchleho poklesu lymfocytov v tele vzniká pretrvávajúca imunodeficiencia, proti ktorej ďalšie rôzne choroby. Napríklad kandidóza, zápal pľúc, alergie, všetky druhy infekcií, tonzilitída a ďalšie.

latentné štádium. Imunodeficiencia postupuje, ochorenie sa zhoršuje a samotný človek stráca v priemere 10 % svojej telesnej hmotnosti.

Štádium sekundárnych chorôb. Aj toto predposledné obdobie má svoje 3 etapy, takzvané 4A, 4B, 4C. Pri absencii správnej liečby sú sily a schopnosti tela značne vyčerpané.

Koncový stupeň. Kritický pokles CD-buniek je menší ako 0,05-109 buniek/l. Koncentrácia protilátok je prakticky určená.

Krvné testy na HIV u detí

Krv dieťaťa ešte dlho po narodení obsahuje materské protilátky proti infekcii HIV. Krvný test, ktorý sa robí v prvom mesiaci života dieťaťa, nemusí potvrdiť infekciu, ale absencia protilátok proti HIV neznamená, že vírus neprenikol cez placentu. Takéto deti by mali byť pozorované počas prvých 3 rokov a mali by sa vykonať príslušné testy.

Aby sa chyba čo najviac eliminovala, mali by sa výsledky laboratórnych odpovedí posudzovať iba v spojení s údajmi všeobecného klinického vyšetrenia.

Moderná diagnostika infekcií HIV takmer úplne vylučuje možnú chybu, až na niektoré body je dôležité čo najskôr využiť.